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單克隆抗體制備-盤點那些(xiē)常用(yòng)的免疫方案

發表時(shí)間:2023-05-08 訪問次數:429

  單克隆抗體制備的相關知(zhī)識大(dà)家應該了(le)解不少了(le),如果還不了(le)解,自(zì)覺去将我們之前發的有關單克隆抗體制備的相關文(wén)章讀一遍。其實在之前我們也(yě)隻是和(hé)大(dà)家簡單聊了(le)聊有關單克隆抗體制備的常規步驟,從(cóng)今天起,我們再和(hé)大(dà)家聊聊其中的一些(xiē)詳細步驟。比如,今天我們就要和(hé)大(dà)家聊一些(xiē)常用(yòng)的免疫方案。

  我們知(zhī)道(dào),免疫是單克隆抗體制備的第一步,它的成功與否直接制約着後面實驗是否要做下(xià)去。所以,選擇一個合适的免疫方案就顯得尤爲重要了(le)。我們常用(yòng)的免疫方案主要有兩種:可溶性抗原和(hé)顆粒性抗原。

  可溶性抗原(這(zhè)個類型的抗原需要進行多次免疫才能(néng)成功):

  初次免疫:将抗原蛋白(bái)用(yòng)等體積的福氏完全佐劑進行乳化,達到(dào)滴水(shuǐ)不化的程度即可。而後,将其注射到(dào)小(xiǎo)鼠背部皮下(xià)組織中,四周後再進行二次免疫;

  二次免疫:同樣的蛋白(bái)乳化後注入初次劑量的一半即可。這(zhè)次需要在兩周後對(duì)小(xiǎo)鼠進行采血,通過離心後測試血清效價,如果已經達到(dào)要求則代表免疫成功,如果達不到(dào)要求,則需要進行三次免疫;

  三次免疫:和(hé)首次免疫同樣劑量的蛋白(bái)溶液,小(xiǎo)鼠融合前3天進行加強免疫;

  顆粒性抗原:

  選擇細胞和(hé)完全佐劑混合,而後對(duì)小(xiǎo)鼠進行皮下(xià)或腹腔注射,2-3周後進行重複注射,3-4天後取脾融合。挑選免疫反應較好(hǎo)的動物,二次免疫後再次取血檢測;

  當然了(le),還可以選用(yòng)脾内注射法或是體外(wài)培養法,具體情況結合自(zì)身的情況來(lái)進行選擇。

  單克隆抗體制備的第一步就是免疫,免疫的過程中需要結合實際情況進行變通,盡量選擇那些(xiē)身體強勁且無疾病的動物,這(zhè)樣能(néng)在更大(dà)程度上(shàng)保證免疫的成功。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供單克隆抗體制備服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。

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