噬菌體展示技術是一種基于定向化技術的高(gāo)通量篩選技術,它能(néng)在極大(dà)程度上(shàng)定向技術在抗體多肽的改造和(hé)篩選方面的應用(yòng),實現(xiàn)外(wài)源肽或蛋白(bái)基因與噬菌體上(shàng)特定蛋白(bái)融合表達的新技術。随着噬菌體展示技術的不斷發展,其優勢得到(dào)了(le)廣泛的認知(zhī),在實驗室中的使用(yòng)也(yě)愈發的頻繁。
那麽,什(shén)麽是噬菌體展示技術呢(ne)?
就理(lǐ)論而言,噬菌體展示相對(duì)來(lái)說非常的簡單,就是通過将外(wài)源肽段和(hé)噬菌體的衣殼蛋白(bái)融合展示與噬菌體表面,然後通過篩選及富集等一系列的技術,提取出我們所需要的蛋白(bái)産品。而且噬菌體展示技術能(néng)夠實現(xiàn)對(duì)人和(hé)其他(tā)動物的B細胞抗體庫進行體外(wài)篩選,能(néng)夠很(hěn)好(hǎo)地避開(kāi)免疫和(hé)細胞融合等步驟,在極大(dà)程度上(shàng)縮短了(le)實驗的周期,并且增加了(le)其穩定性。因爲噬菌體展示技術具備篩選容量大(dà)、可發酵生産、操作(zuò)簡單等一系列的優勢,使得它在之後的使用(yòng)中變得越發的廣泛。
噬菌體展示技術的優勢體現(xiàn)在哪些(xiē)方面?
1、固相和(hé)液相噬菌體展示文(wén)庫篩選經驗豐富,可自(zì)動化進行噬菌體展示高(gāo)通量篩選,實現(xiàn)快(kuài)速交付;
2、高(gāo)達1010以上(shàng)的天然抗體文(wén)庫庫容以及107以上(shàng)的免疫抗體文(wén)庫庫容;
3、通過先進的親和(hé)力檢測技術,可以深入地檢測其生物信息,從(cóng)而選擇出最佳的人源框架區(qū)序列,快(kuài)速且高(gāo)通量地篩選出高(gāo)親和(hé)力、高(gāo)産量的人源化抗體
4、片段插入率高(gāo),可達90%以上(shàng);
噬菌體抗體庫構建:
1、噬菌體展示技術的使用(yòng)流程
2、随機多肽/蛋白(bái)多肽核酸序列合成
3、組織RNA抽提及cDNA制備目的基因/抗體基因克隆基因插入載體電轉大(dà)腸杆菌抗體庫庫容及多樣性檢測
抗體庫篩選:
靶分子暴露靶分子與噬菌體結合洗脫擴增得到(dào)篩選到(dào)的基因及表達産物。
總的來(lái)說,噬菌體展示技術能(néng)夠帶來(lái)很(hěn)多傳統蛋白(bái)表達方式所無法達到(dào)的效果,而且因爲其優勢,使得其在生産一些(xiē)蛋白(bái)的時(shí)候,能(néng)減少中間過程,降低(dī)其生産周期。随着噬菌體展示技術的不斷提升,相信未來(lái)會(huì)有更多更迅速的方法産生蛋白(bái)。