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大(dà)腸杆菌是第一個用(yòng)于蛋白(bái)生産的宿主菌，因爲它的遺傳背景清晰，培養操作(zuò)的過程簡單，而且引起它轉化快(kuài)、傳導效率高(gāo)、生長快(kuài)等優點，最主要的是因爲其成本低(dī)廉，使得其廣泛地使用(yòng)與蛋白(bái)制備上(shàng)。而且因爲其蛋白(bái)表達要遠高(gāo)于其他(tā)基因表達系統，使得其成爲使用(yòng)最爲廣泛的蛋白(bái)表達系統。
那麽，大(dà)腸杆菌蛋白(bái)表達的組成是什(shén)麽呢(ne)?
1、表達載體
直接通過載體來(lái)進行蛋白(bái)表達。我們知(zhī)道(dào)，完整的載體必須有複制的起點、啓動子、插入基因、篩選标記和(hé)終止子。所以，我們隻需要根據蛋白(bái)生成的環境對(duì)其進行表達，或者通過在目的蛋白(bái)的N端或C端加入特殊序列，促進蛋白(bái)的可溶性和(hé)正确折疊;
2.外(wài)源基因
在大(dà)腸杆菌表達體系中要表達的基因即外(wài)源基因，包括原核基因和(hé)真核基因;原核基因可以在大(dà)腸杆菌中直接表達出來(lái)，但(dàn)是真核基因韓有内含子不能(néng)，大(dà)腸杆菌不能(néng)對(duì)mRNA進行剪切，從(cóng)而形成成熟的mRNA，所以真核基因一般以cDNA的形式在大(dà)腸杆菌表達系統中表達。此外(wài)還需提供大(dà)腸杆菌能(néng)識别的且能(néng)轉錄翻譯真核基因的元件。
3、表達宿主菌
直接采用(yòng)大(dà)腸杆菌來(lái)進行蛋白(bái)表達。當然了(le)，宿主菌的選擇需要基于宿主細菌的特性和(hé)靶蛋白(bái)的特征來(lái)進行。
