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大(dà)腸杆菌作(zuò)爲最早用(yòng)來(lái)生産蛋白(bái)的一種方式，爲我們的健康起到(dào)了(le)非常大(dà)的作(zuò)用(yòng)。如果采用(yòng)大(dà)腸杆菌來(lái)作(zuò)爲宿主生物，它具備生長快(kuài)速、親公司那個實現(xiàn)以及外(wài)源DNA轉化快(kuài)速等優點，使得它的使用(yòng)非常的廣泛。但(dàn)是，我們日常在大(dà)腸杆菌生産的過程中嘗嘗會(huì)遇到(dào)一些(xiē)小(xiǎo)問題，導緻所産生的蛋白(bái)達不到(dào)我們的要求，今天，普健生物就在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家具體聊聊大(dà)腸杆菌重組蛋白(bái)表達。
1、質粒的選擇
我們常說的質粒包括複制子、啓動子、選擇标記、多個克隆位點等，因爲需要選擇的選項比較多，而且表達載體的目錄比較大(dà)，所以，我們時(shí)常會(huì)出現(xiàn)選擇出錯的情況。這(zhè)個時(shí)候，我們就需要根據個人的需求去仔細選擇，這(zhè)樣才能(néng)避免相關問題的出現(xiàn);
2、複制子
複制子其實就是由一個複制起點和(hé)相應的順式作(zuò)用(yòng)控制元件所組成，而我們日常工(gōng)作(zuò)中想要選擇合适的載體時(shí)，最需要注意的一個重要參數就是基因拷貝數，而基因拷貝數的控制權則位于複制子中。高(gāo)質粒數量的複制子在極大(dà)程度上(shàng)會(huì)造成代謝(xiè)負擔的提升，可能(néng)會(huì)導緻細菌的生長速度出現(xiàn)降低(dī)的現(xiàn)象，而且可能(néng)會(huì)造成質粒不穩定的現(xiàn)象，最終導緻用(yòng)于蛋白(bái)合成的健康生物數量下(xià)降;
3、其他(tā)可能(néng)遇到(dào)的問題
雖然說現(xiàn)在可以通過一定的手段來(lái)實現(xiàn)在短期内處理(lǐ)數百種蛋白(bái)，但(dàn)是這(zhè)項技術存在着一定的局限性，需要在後期的實驗中不斷改進。而且對(duì)于大(dà)部分的實驗室來(lái)說，自(zì)動化平台相對(duì)昂貴，價格相對(duì)來(lái)說難以承受;
總的來(lái)說，大(dà)腸杆菌蛋白(bái)表達所具備的優勢是無與倫比的，因爲其周期短、操作(zuò)簡單、失敗率低(dī)的情況，隻要我們做好(hǎo)相應的準備工(gōng)作(zuò)，按照程序來(lái)設計(jì)，這(zhè)樣就能(néng)在極大(dà)程度上(shàng)降低(dī)其失敗的情況。更多蛋白(bái)表達的相關知(zhī)識，敬請(qǐng)關注普健生物。
