聯系我們
對(duì)于重組蛋白(bái)表達來(lái)說，我們常常會(huì)在實驗過程中遇到(dào)這(zhè)樣或那樣的問題，最終導緻蛋白(bái)表達的效果達不到(dào)我們的預期。雖然我們通過哺乳動物表達系統克服了(le)原核翻譯後修飾表達的問題，而且通過瞬時(shí)表達和(hé)穩定轉染等一系列的方法有效地提升了(le)表達率，但(dàn)是也(yě)因爲成本高(gāo)、操作(zuò)難度大(dà)，不适合小(xiǎo)型公司的使用(yòng)。
那麽，有沒有什(shén)麽辦法可以提升小(xiǎo)規模重組蛋白(bái)表達效率呢(ne)?答(dá)案是肯定的。
方法一：序列優化
根據使用(yòng)需求，設計(jì)最佳的編碼序列用(yòng)于表達蛋白(bái)。總的來(lái)說，就是在開(kāi)始蛋白(bái)表達之前，我們就通過密碼子優化算(suàn)法以及一些(xiē)表達載體選擇，爲表達提供優質的環境，這(zhè)樣能(néng)在極大(dà)程度上(shàng)提升蛋白(bái)表達的效率;
方法二：提升蛋白(bái)溶解度
因爲溶解度低(dī)的問題，也(yě)會(huì)導緻蛋白(bái)表達的效率降低(dī)。因此，我們可以通過溫度調控、培養基選擇、加入一些(xiē)添加劑等方法來(lái)提升蛋白(bái)溶解度，以便于提升蛋白(bái)的表達效率;
方法三：輔助融合劑使用(yòng)
比如蛋白(bái)标簽的使用(yòng)。我們知(zhī)道(dào)，當我們将标簽蛋白(bái)插入到(dào)重組蛋白(bái)表達序列上(shàng)時(shí)，蛋白(bái)的表達效率就能(néng)夠得到(dào)有效的提升，而後再通過酶切或添加化學試劑的方式切除的方式去除。當然了(le)，在選擇之前，我們需要針對(duì)特定的表達系統選擇合适的标簽，這(zhè)個需要結合多種因素進行考慮;
方法四：純化方法優化
針對(duì)下(xià)遊的使用(yòng)需求和(hé)純度需求來(lái)設計(jì)不同的純化方法。一般來(lái)說，對(duì)于蛋白(bái)表達量高(gāo)的可以考慮一步式親和(hé)純化，如果需要進一步純化，可使用(yòng)親和(hé)純化後分子排阻色譜進行。當然了(le)，在不同情況下(xià)，也(yě)可以考慮使用(yòng)離子交互色譜;
通過如上(shàng)的方法，再結合自(zì)己的需求來(lái)設計(jì)，這(zhè)樣就能(néng)在一定程度上(shàng)提升蛋白(bái)的表現(xiàn)率。當然了(le)，針對(duì)不同的情況，還可以适當的增加一些(xiē)其他(tā)方法，畢竟不同的使用(yòng)環境下(xià)，方法也(yě)是各不相同的。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供重組蛋白(bái)表達服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
