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抗體測序，其實就是對(duì)抗體蛋白(bái)進行從(cóng)頭到(dào)尾的一次序列測試工(gōng)作(zuò)，它廣泛應用(yòng)于基因組序列、外(wài)顯子序列、DNA甲基化序列以及RNA轉錄組序列。在我們進行單克隆抗體生産的時(shí)候，就常常會(huì)使用(yòng)抗體測序技術，可以說，雜(zá)交瘤技術是目前抗體測序技術會(huì)用(yòng)最廣泛且最成熟的一個平台。
什(shén)麽是抗體測序技術?
其實抗體測序技術的原理(lǐ)和(hé)我們上(shàng)面說的一樣，就是通過對(duì)抗體蛋白(bái)進行從(cóng)頭到(dào)尾的測序。通過多酶解技術，通過高(gāo)分辨率質譜和(hé)獨特的數據分析的方式來(lái)進行相關序列的檢測。其原理(lǐ)爲通過測量串聯質譜中兩個片段離子之間的質量差來(lái)确定蛋白(bái)氨基酸殘基的質量，然後沿着蛋白(bái)的主鏈來(lái)确定每個氨基酸，最終得到(dào)氨基酸的完整序列的方式。
抗體測序的主要流程是什(shén)麽?
1、全序列覆蓋
在通過如上(shàng)方法進行抗體測序的時(shí)候，需要确保每個點位的氨基酸有超過10中不同的肽段支持，在對(duì)氨基酸進行質量控制，确保每個質譜裏都有強離子片段峰證據。這(zhè)樣，才能(néng)保證其全序列覆蓋;
2、抗體質量核對(duì)
對(duì)輕重鏈進行質量測定，确保其在範圍内，以确保組裝的抗體序列;
3、亮(liàng)氨酸和(hé)異亮(liàng)氨基酸确定
亮(liàng)氨酸和(hé)異亮(liàng)氨酸的殘基通常是無法區(qū)分的，但(dàn)是卻又容易造成其親和(hé)力出現(xiàn)偏差的情況。所以，我們在進行相關測試的時(shí)候，可以使用(yòng)一種集成的策略，通過同源性數據統計(jì)的方式，明(míng)确區(qū)分亮(liàng)氨酸和(hé)異亮(liàng)氨酸;
其實抗體測序的原理(lǐ)并不複雜(zá)，但(dàn)是，很(hěn)多用(yòng)戶在自(zì)行進行相關測序的時(shí)候，往往會(huì)出現(xiàn)這(zhè)樣或那樣的問題，最終造成結果偏差的情況。總的來(lái)說，主要是一些(xiē)細節方面的問題，隻要将這(zhè)些(xiē)方面的做好(hǎo)，測序則完全不是問題。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供抗體制備、蛋白(bái)表達以及抗體測序服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
