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雜(zá)交瘤測序是單克隆抗體制備中常用(yòng)的一種手段，通過對(duì)雜(zá)交瘤細胞中的抗體基因序列進行測序，而後記錄其結構信息的方式。而後在後續的抗體制備過程中，直接采用(yòng)這(zhè)個序列來(lái)制備抗體的方式。雜(zá)交瘤測序技術對(duì)于抗體的特異性和(hé)功能(néng)性是非常重要的，那麽，其具體測序是怎樣的呢(ne)?今天，普健生物在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家具體聊聊。
1、雜(zá)交瘤細胞構建。提取免疫後的淋巴B細胞，而後将其與骨髓瘤細胞融合，形成雜(zá)交瘤細胞;
2、細胞篩選。對(duì)所得雜(zá)交瘤細胞進行培養，而後提取出其中融合成功的雜(zá)交瘤細胞(可以通過在其中添加抗生素等方法來(lái)實現(xiàn))，而後對(duì)其進行細胞株培養;
3、DNA或RNA提取。從(cóng)篩選所得的細胞株中提取出DNA或RNA;
4、擴增。使用(yòng)聚合酶鏈反應技術，而後對(duì)特定抗體基因片段進行擴增，以便于從(cóng)複雜(zá)的基因組序列中快(kuài)速擴增出特定序列;
5、抗體測序。對(duì)所得抗體基因片段進行測序(可以使用(yòng)傳統的測序技術，也(yě)可以使用(yòng)高(gāo)通量的下(xià)一代測序技術);
6、序列分析。多所得抗體序列進行分析，識别其中的可變區(qū)和(hé)常數區(qū)，對(duì)抗體的特異性和(hé)功能(néng)性進行進一步分析;
通過如上(shàng)的步驟就能(néng)夠讓我們獲得單克隆抗體的序列信息，通過雜(zá)交瘤測序，能(néng)夠爲我們後續的研究提供重要的數據支持。總的來(lái)說，所得序列可以讓我們保持後期抗體制備的特異性和(hé)穩定性，能(néng)夠在最大(dà)程度上(shàng)降低(dī)抗體批次之間的差異性。如果您有相關雜(zá)交瘤測序的需求，歡迎聯系普健生物。
