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雜(zá)交瘤技術也(yě)叫做單克隆抗體技術，它是一種在細胞融合技術上(shàng)發展起來(lái)的抗體制備技術。雜(zá)交瘤細胞技術通過将骨髓瘤細胞與免疫的動物脾細胞相融合，從(cóng)而形成能(néng)夠無限增殖且可以生産單克隆抗體的細胞。那麽，您對(duì)雜(zá)交瘤細胞抗體制備技術了(le)解多少呢(ne)?今天普健生物在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家具體聊聊。
雜(zá)交瘤細胞制備的主要步驟：
1、細胞的選擇與細胞融合
特異性抗體制備的一方必須是免疫後的B細胞，通常情況下(xià)，我們都會(huì)選擇面以後的動物脾細胞，因爲脾是B細胞的主要彙聚場所，隻要發生免疫反應，脾髒中就一定會(huì)出現(xiàn)免疫應答(dá)。融合細胞的另外(wài)一方通常選擇骨髓瘤細胞，因爲需要其擁有不斷繁殖的特性。
通常情況下(xià)，我們都會(huì)選擇細胞融合劑來(lái)進行細胞的融合，它會(huì)對(duì)細胞膜造成一定的損傷，也(yě)使得細胞更加容易粘連在一起。一般來(lái)說，我們會(huì)選擇聚乙二醇來(lái)充當細胞融合劑，在40%的濃度下(xià)，其能(néng)夠最低(dī)程度上(shàng)對(duì)細胞造成損傷，同時(shí)又能(néng)産生最高(gāo)頻的融合;
2、細胞培養
細胞融合是一個物理(lǐ)過程，在融合的過程中會(huì)出現(xiàn)呈現(xiàn)出各種樣式，比如脾-瘤細胞、脾-脾細胞、瘤-瘤細胞等。但(dàn)是，正常的脾細胞在培養基中僅能(néng)存活5-7天，細胞多聚體也(yě)容易死去，所以，我們僅需将瘤細胞去除即可。而後，在對(duì)剩餘的細胞進行培養，以獲得我們所需細胞;
3、特異性抗體篩選
因爲細胞的融合是一個随機的過程，所以，我們需要有針對(duì)性地對(duì)其進行篩選清除。一般來(lái)說，篩選分爲兩步：第一步是對(duì)融合細胞的抗體進行篩選，第二步是對(duì)抗體進行特異性篩選。一般來(lái)說，我們可以對(duì)融合細胞進行稀釋，均勻分爲到(dào)培養闆的每個孔中，培養後取上(shàng)清液用(yòng)ELISA法選出高(gāo)分泌性的細胞(也(yě)就是我們常說的克隆)。而後，對(duì)這(zhè)些(xiē)細胞再次進行克隆化，找出其中陽性細胞株，擴增後再進行凍存、培養等操作(zuò);
當然了(le)，雜(zá)交瘤細胞抗體篩選的過程更加地複雜(zá)，而且其中涉及到(dào)很(hěn)多精細化操作(zuò)，需要專業技術的人員進行操作(zuò)。而且有很(hěn)多細節方面的工(gōng)作(zuò)需要引起注意，否則，很(hěn)容易造成雜(zá)交瘤細胞融合不成功的現(xiàn)象。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供雜(zá)交瘤細胞抗體制備服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
