聯系我們
雜(zá)交瘤細胞制備抗體技術相信大(dà)家都不覺得陌生了(le)，它就是一種将免疫後的B淋巴細胞和(hé)骨髓瘤細胞融合後産生單克隆抗體的傳統方法。如果想了(le)解雜(zá)交瘤相關的具體知(zhī)識，可以點擊“什(shén)麽是雜(zá)交瘤測序?它的操作(zuò)流程是怎樣的?”查看(kàn)。今天，普健生物在這(zhè)裏簡單和(hé)大(dà)家介紹一下(xià)有關雜(zá)交瘤技術制備單克隆抗體時(shí)常見的一些(xiē)問題。
一、微生物污染
1、細菌和(hé)真菌污染一般都是因爲操作(zuò)不當所導緻，除了(le)實驗之前做好(hǎo)日常消殺外(wài)，還需要确保消毒劑的純度及質量;
2、支原體污染則可能(néng)是因爲血清制品以及相關實驗材料污染所導緻，一般來(lái)說，短期污染沒什(shén)麽明(míng)顯變化，但(dàn)是時(shí)間長了(le)之後可能(néng)會(huì)導緻細胞生長緩慢。所以，在購買相關産品的時(shí)候，要盡量保證相關産品的純度，減少不必要的麻煩;
3、原聲生物污染常見的主要爲黑膠蟲，污染後會(huì)出現(xiàn)一些(xiē)小(xiǎo)黑點;
二、細胞不生長
1、最常見的原因是因爲融合試劑有毒，需要進行替換;
2、使用(yòng)的血清質量很(hěn)差，可以優先考慮胎牛血清;
3、添加劑比例不正常;
三、細胞不分泌抗體
1、細胞直接不分泌抗體一般來(lái)說主要是因爲抗原免疫性差所導緻，脾髒損傷嚴重等;
2、後期分泌抗體越來(lái)越少主要因爲骨髓瘤繁殖被抑制、克隆不及時(shí)以及染色體丢失等情況導緻;
四、細胞克隆困難
1、對(duì)已有雜(zá)交瘤細胞進行篩選;
2、在培養基中加入IL-6;
其實大(dà)家不難看(kàn)出，導緻雜(zá)交瘤細胞制備抗體困難或失敗的原因主要是因爲細節方面的錯誤操作(zuò)導緻。所以，我們在日常抗體制備時(shí)，不僅要嚴格按照實驗流程來(lái)，而且需要注意各個細節方面的問題。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供雜(zá)交瘤制備單克隆抗體服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
