說到(dào)雜(zá)交瘤測序,大(dà)家或許并不怎麽熟悉,但(dàn)是說到(dào)抗體測序的話(huà),相信大(dà)家一定會(huì)非常的了(le)解。在我們制備單克隆抗體時(shí),常常會(huì)使用(yòng)到(dào)雜(zá)交瘤技術,制備出的雜(zá)交瘤需要盡快(kuài)凍存,但(dàn)是,凍存過程中往往會(huì)出現(xiàn)失活的現(xiàn)象。所以,我們就需要對(duì)篩選出的雜(zá)交瘤細胞進行相關測序工(gōng)作(zuò)。
經過測序後的雜(zá)交瘤,能(néng)夠知(zhī)道(dào)其完整的序列,後期在制備單克隆抗體的時(shí)候,可以通過相關序列通過重組抗體來(lái)制備所需抗體。不僅能(néng)解決雜(zá)交瘤失活的現(xiàn)象,也(yě)能(néng)保證抗體不同批次之間的一緻性。當然了(le),雜(zá)交瘤測序的意義不止于此。
雜(zá)交瘤測序的流程是怎樣的呢(ne)?
1、雜(zá)交瘤細胞RNA提取。從(cóng)雜(zá)交瘤細胞中提取完整的RNA序列;
2、RNA反轉錄。通過反轉錄,獲得完整的DNA序列;
3、獲得抗體輕重鏈基因。通過一系列剪切提取的操作(zuò),獲得抗體重鏈/輕鏈的可變區(qū)基因;
4、輕重鏈基因測序。通過抗體測序的手段,測定輕重鏈的基因序列;
5、基因生物學分析。分析所得基因的生物學特性,剔除其中非功能(néng)性DNA,最終獲得我們所需抗體序列;
6、得到(dào)抗體序列;
相對(duì)于那些(xiē)直接對(duì)抗體進行蛋白(bái)分析從(cóng)而得到(dào)基因序列的方式相比,雜(zá)交瘤測序所得的基因序列更加的準确,而且能(néng)夠有效避免了(le)因爲亮(liàng)氨酸和(hé)異亮(liàng)氨酸難以區(qū)分的問題。所以,總的來(lái)說,雜(zá)交瘤測序的準确性更高(gāo),使用(yòng)起來(lái)也(yě)更加的方便,也(yě)爲抗體人源化的實現(xiàn)奠定了(le)更好(hǎo)的基礎。普健生物專業爲廣大(dà)該用(yòng)戶提供雜(zá)交瘤測序服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。