在單克隆抗體制備時(shí),我們常常會(huì)選擇雜(zá)交瘤抗體制備的方式來(lái)進行,而雜(zá)交瘤測序是其中必不可少的一個過程。因爲雜(zá)交瘤抗體測序不僅能(néng)更好(hǎo)地避免雜(zá)交瘤細胞失活甚至希望的風(fēng)險,而且能(néng)更好(hǎo)地保證後期抗體的一緻性。那麽,雜(zá)交瘤測序一般需要經過哪些(xiē)過程呢(ne)?今天,普健生物就和(hé)大(dà)家詳細描述一下(xià)。
1、樣本收集。從(cóng)目标雜(zá)交瘤中收集細胞樣本,其中包含DNA或RNA;
2、核酸提取。使用(yòng)核酸提取方法從(cóng)樣本中提取出DNA或RNA(當然了(le),具體方法可以結合實際情況來(lái)進行選擇);
3、文(wén)庫構建。對(duì)于DNA測序,這(zhè)通常涉及将DNA片段進行片段化,然後連接到(dào)測序适配體上(shàng)。對(duì)于RNA測序,通常先轉錄成cDNA,然後進行片段化和(hé)适配體連接;
4、PCR擴增。對(duì)文(wén)庫中的DNA或RNA片段進行PCR擴增,以增加其數量,以便進行下(xià)一步的測序;
5、基因測序。使用(yòng)測序技術對(duì)PCR擴增的文(wén)庫進行測序;
6、數據分析。對(duì)産生的測序數據進行生物信息學分析。包括将測序reads映射到(dào)參考基因組或轉錄組上(shàng),進行拼接、變異檢測、基因表達分析等;
7、結果解釋。根據數據分析的結果,解釋雜(zá)交瘤中的DNA或RNA序列的特征、變異和(hé)功能(néng);
當然了(le),對(duì)于不同公司來(lái)說,其具體的操作(zuò)流程可能(néng)存在一定的差異,但(dàn)是,總的來(lái)說,大(dà)體的過程相差不大(dà),隻是在一些(xiē)細節操作(zuò)方面存在着一定的問題。當然了(le),想要提供雜(zá)交瘤測序服務需要有相當豐富的經驗以及技術支持,否則,很(hěn)難達到(dào)具體的需求。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供雜(zá)交瘤測序服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。