雜(zá)交瘤抗體制備相信大(dà)家都不陌生,當我們需要進行單克隆抗體生産的時(shí)候都會(huì)使用(yòng)都雜(zá)交瘤。但(dàn)是我們知(zhī)道(dào),雜(zá)交瘤細胞在保存的過程中容易出現(xiàn)污染、基因丢失、細胞狀态比好(hǎo)等問題,在後期的使用(yòng)中會(huì)嚴重影響到(dào)抗體的質量。所以,一般情況下(xià),我們都會(huì)進行雜(zá)交瘤測序,以保證後期外(wài)源抗體的穩定表達。
什(shén)麽是雜(zá)交瘤測序?
雜(zá)交瘤測序的概念其實并不困難,主要是通過提取雜(zá)交瘤細胞中抗體基因序列,并對(duì)進行相應的測序工(gōng)作(zuò),得到(dào)所需段卡尼的核苷酸序列。當後期需要使用(yòng)的時(shí)候,可以按照序列制備出相應的mRNA,然後再根據mRNA反轉錄出mDNA,之後再進行基因序列的重組蛋白(bái)表達,最終獲得我們所需的抗體。
雜(zá)交瘤測序服務的内容具體有哪些(xiē)呢(ne)?
普健生物雜(zá)交瘤測序的過程主要分爲五個階段,其中的一些(xiē)階段會(huì)根據實際需求進行增減。
階段一:cDNA擴增。通過細胞裂解,擴增第一聯cDNA;
階段二:抗體基因擴增。對(duì)基因進行預擴增,并且分階段對(duì)基因進行特異性擴增;
階段三:基因測序。将基因可控到(dào)載體中,而後進行相關核酸序列的測定,并對(duì)其生物學信息進行分析;
階段四:抗體表達驗證(可選)。通過測序所得基因及逆轉錄,制備質粒,并對(duì)基因進行瞬時(shí)轉染,并進行相關抗體性質檢測;
階段五:抗體表達及純化(可選)。對(duì)所得抗體進行純化操作(zuò);
總的來(lái)說,雜(zá)交瘤測序的意義非常重大(dà),不僅能(néng)夠減少雜(zá)交瘤傳代過程中純在的不穩定因素,而且能(néng)夠避免因爲批次不同的問題而造成的抗體性質不同的現(xiàn)象。雜(zá)交瘤測序操作(zuò),能(néng)夠有效地避免這(zhè)類情況的發生,通過重組蛋白(bái)表達的方式,獲得優質的抗體産品。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供雜(zá)交瘤測序服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。