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想要做好(hǎo)重組蛋白(bái)表達?如下(xià)幾點一定要引起注意

發表時(shí)間:2022-12-14 訪問次數:598

  說到(dào)重組蛋白(bái)表達,相信大(dà)家已經不再陌生了(le),因爲在一些(xiē)藥品的使用(yòng)中會(huì)經常使用(yòng)到(dào)。而對(duì)于實驗室來(lái)說,重組蛋白(bái)制備實驗可以說是非常的常見,而且操作(zuò)起來(lái)也(yě)非常的規範。那麽,蛋白(bái)的制備是不是就非常的簡單了(le)呢(ne)?其實不然!在日常重組蛋白(bái)表達的實驗中,我們需要注意如下(xià)的一些(xiē)事(shì)項。

  1、如何得到(dào)可溶性的蛋白(bái)

  這(zhè)個問題也(yě)是我們蛋白(bái)表達過程中最常見的問題之一,雖然說蛋白(bái)表達出來(lái)了(le),但(dàn)是卻不溶,導緻所得蛋白(bái)無法使用(yòng)。一般這(zhè)個情況,就是因爲我們選擇的表達菌株不對(duì),需要更換合适的菌株才行;

  2、如何讓蛋白(bái)産量最大(dà)化

  主要還是因爲溫度的緣故。經實驗發現(xiàn),在37度的環境下(xià),蛋白(bái)容易出現(xiàn)包涵體,而在30度的時(shí)候,可溶性蛋白(bái)的産量會(huì)提升,15-20度的環境下(xià),誘導性蛋白(bái)的産量會(huì)達到(dào)最大(dà);

  3、如何避免包涵體和(hé)内毒素的産生

  包涵體的産生主要是因爲蛋白(bái)溶解性達到(dào)最大(dà)後,導緻蛋白(bái)析出的情況。所以,這(zhè)個時(shí)候我們不妨換個角度,用(yòng)無細胞表達系統來(lái)試試,通過實驗,它不僅能(néng)有效避免包涵體、内毒素等物質的産生,而且蛋白(bái)表達率也(yě)很(hěn)高(gāo);

  當然了(le),重組蛋白(bái)表達需要注意的事(shì)項并不止我們說的如上(shàng)幾個方面,具體操作(zuò)中很(hěn)多細節方面也(yě)要引起注意,否則也(yě)可能(néng)會(huì)造成蛋白(bái)表達的失敗。當然了(le),按照相關文(wén)獻給與的方式操作(zuò)下(xià)來(lái),一般都不會(huì)出現(xiàn)太大(dà)問題,隻是因爲相關投入與産出難成正比,制備的蛋白(bái)無法滿足實驗需求等問題,可能(néng)會(huì)對(duì)您造成困擾。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供重組蛋白(bái)制備服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。