聯系我們
昆蟲表達系統相信大(dà)家都不會(huì)陌生，它是四大(dà)蛋白(bái)表達系統之一(主要包含：原核細胞表達系統、酵母表達系統、昆蟲表達系統以及哺乳動物表達系統)。關于昆蟲表達系統我們在前面和(hé)大(dà)家簡單介紹過，今天我們再和(hé)大(dà)家具體聊聊有關昆蟲表達系統的優缺點及其詳細的制備步驟。
昆蟲表達系統的優點：
1、能(néng)夠輕松時(shí)間糖基化、乙酰化、磷酸化等翻譯修飾操作(zuò);
2、分子特性相對(duì)簡單，使得其操作(zuò)起來(lái)更加的簡單;
3、因爲其細胞能(néng)夠懸浮生長，使得其培養起來(lái)更加的簡單;
4、對(duì)于外(wài)源基因能(néng)夠實現(xiàn)高(gāo)效表達且其繁殖不受外(wài)源基因影響;
昆蟲表達系統的步驟：
1、引物設計(jì)與合成
選擇合适的基因序列，并将目的基因引入到(dào)序列中;
2、基因擴增與克隆
通過所得RNA進行反轉率，合成我們所需的cDNA，并以cDNA爲模闆，對(duì)其進行擴增和(hé)測序;
3、病毒質粒構建
将擴增所得基因克隆到(dào)質粒中，并對(duì)其進行培育、擴增;
4、表達蛋白(bái)
通過設計(jì)合理(lǐ)的表達環境，對(duì)所得基因序列進行表達，獲得蛋白(bái)表達産物的混合液;
5、蛋白(bái)純化及鑒定
通過蛋白(bái)純化的手段對(duì)蛋白(bái)進行提取和(hé)純化，并對(duì)純化後的蛋白(bái)進行鑒定，以測定所得蛋白(bái)是否符合我們需求;
大(dà)家應該不難看(kàn)出，昆蟲表達系統和(hé)其他(tā)表達系統的表達步驟之間并不存在太大(dà)的差别，隻是在選擇宿主方面存在着不同，其他(tā)步驟大(dà)概類似。但(dàn)是，想要表達成功，則有很(hěn)多細節方面需要引起注意，而恰恰是這(zhè)些(xiē)細節制約着所得蛋白(bái)是否能(néng)夠滿足需求。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供昆蟲表達蛋白(bái)服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
