現(xiàn)階段,除了(le)需要應對(duì)某些(xiē)特别病毒(比如新冠剛出現(xiàn)之時(shí)),市面上(shàng)所擁有的重組蛋白(bái)産品基本上(shàng)都能(néng)夠滿足我們的需求了(le)。隻要我們提出需求,結合需求尋找産品,基本上(shàng)都能(néng)夠找到(dào)能(néng)夠一用(yòng)的産品。但(dàn)是,又有一些(xiē)用(yòng)戶禁不住要問了(le):你(nǐ)們的蛋白(bái)保質期多久?你(nǐ)們的蛋白(bái)爲什(shén)麽是凍幹的?凍幹的蛋白(bái)如何重構等等。今天,普健生物就在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家具體聊聊。
1、重組蛋白(bái)爲什(shén)麽要做成凍幹樣式?
其實我們知(zhī)道(dào),大(dà)部分重組蛋白(bái)對(duì)溫度非常的敏感,即便是在制備過程中溫度提升都有可能(néng)造成表達量降低(dī)或蛋白(bái)析出的情況,所以,隻有使用(yòng)凍幹的方式來(lái)保留大(dà)部分蛋白(bái)的活性。爲什(shén)麽說大(dà)部分?因爲畢竟出現(xiàn)了(le)一次操作(zuò),一小(xiǎo)部分的蛋白(bái)也(yě)會(huì)因此失去活性。同時(shí),凍幹粉的保存時(shí)間更長,運輸費用(yòng)也(yě)相對(duì)會(huì)降低(dī);
2、重組蛋白(bái)凍幹前會(huì)不會(huì)加什(shén)麽保護劑?
在對(duì)蛋白(bái)進行凍幹之前,我們都會(huì)向其中添加保護劑,比如糖類、多元醇、聚合物、表面活性劑、某些(xiē)蛋白(bái)和(hé)氨基酸。這(zhè)類保護劑不僅能(néng)夠更好(hǎo)地進行凍幹,也(yě)能(néng)更好(hǎo)地對(duì)蛋白(bái)進行保護,降低(dī)其失活率;
3、爲什(shén)麽買的管内幾乎看(kàn)不到(dào)蛋白(bái)?
其實最開(kāi)始我也(yě)覺得很(hěn)奇怪,爲什(shén)麽看(kàn)到(dào)冰櫃裏面凍着一些(xiē)空(kōng)管?其實我們在對(duì)蛋白(bái)進行凍幹時(shí),更多的蛋白(bái)附着在管壁内側,形成了(le)一層很(hěn)薄或肉眼不可見的蛋白(bái)層,乍看(kàn)之下(xià)确實像是個空(kōng)管;
4、凍幹粉如何重構蛋白(bái)?
其實在說明(míng)書中都會(huì)附着一份凍幹粉的使用(yòng)說明(míng),裏面會(huì)詳細介紹有關重構的方法。當然了(le),一般情況下(xià)我們可以選擇無菌水(shuǐ)來(lái)進行複溶,加入等體積的無菌水(shuǐ),輕輕搖晃即可。切記,千萬不可渦旋;
5、什(shén)麽是載體蛋白(bái)?
其實就是類似保護劑,用(yòng)于提高(gāo)蛋白(bái)的穩定性,有助于其能(néng)夠更好(hǎo)地附着在瓶壁上(shàng);
6、得到(dào)重組蛋白(bái)後要如何保存?
重組蛋白(bái)到(dào)我們手裏了(le),但(dàn)是不是現(xiàn)用(yòng),要怎麽保存呢(ne)?其實說明(míng)書上(shàng)有它的保存方式,按照這(zhè)個溫度進行保存即可。當然了(le),如果已經複溶,那就需要對(duì)其進行分裝,并在-20度的環境下(xià)保存;
PS:大(dà)部分的蛋白(bái)的保質期隻有一年,需要将其放(fàng)置在最佳保存溫度下(xià),同時(shí)盡量不要反複凍融;
7、所得重組蛋白(bái)的數量要如何确定?
采用(yòng)不同的測定方式,所得蛋白(bái)含量的差異會(huì)很(hěn)大(dà),我們通常會(huì)采用(yòng)BCA、SDS-PAGE等方法進行檢測;
如上(shàng),基本上(shàng)就能(néng)解答(dá)我們需要使用(yòng)蛋白(bái)的各種問題,當然了(le),特殊蛋白(bái)肯定需要特殊對(duì)待,不過結合說明(míng)書,也(yě)基本上(shàng)不會(huì)存在什(shén)麽問題。當然了(le),結合需求沒有找到(dào)合适的産品時(shí),我們就需要進行重組抗體定制服務,這(zhè)樣才能(néng)獲得我們所需功能(néng)的蛋白(bái)産品。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供重組蛋白(bái)制備服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。
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