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重組蛋白(bái)表達和(hé)傳統的蛋白(bái)表達方式有一定的區(qū)别，因爲其通過基因重組後表達，所以容易造成一些(xiē)傳統表達中不會(huì)遇到(dào)的問題。雖然說這(zhè)個問題是一個老(lǎo)生常談的話(huà)題了(le)，但(dàn)是，其重要程度卻不言而喻。那麽，哪些(xiē)因素會(huì)影響到(dào)重組蛋白(bái)表達的結果呢(ne)?普健生物在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家具體聊聊。
1、載體構建錯誤
其實這(zhè)是一個新人最常犯的錯誤，因爲弄錯讀碼框，導緻蛋白(bái)出現(xiàn)不表達的情況。載體的構建可以說是蛋白(bái)表達的基礎，需要考慮到(dào)啓動子、克隆位點、終止子、标簽等多種因素，隻有将這(zhè)一步做好(hǎo)了(le)，重組蛋白(bái)表達才能(néng)夠進行下(xià)去;
2、宿主菌選擇不當
不同的菌種因爲其基因型不同，适合于表達的蛋白(bái)也(yě)是各不相同的。如果選擇不當，不僅會(huì)造成蛋白(bái)表達率低(dī)，甚至可能(néng)因爲内毒素的緣故，造成蛋白(bái)性質改變的情況;
3、密碼子優化不當
不同的基因在密碼子的使用(yòng)上(shàng)有着明(míng)顯的偏愛性，不同物種在啓動子上(shàng)也(yě)是各不相同，所以，一定要結合選擇宿主和(hé)目的基因的特性來(lái)選擇合适的啓動子;
4、mRNA穩定性及結構
當mRNA穩定性不足，或者結構發生折疊後，會(huì)造成後期反轉錄時(shí)出現(xiàn)問題，自(zì)然也(yě)就造成了(le)蛋白(bái)表達不準确或發生沉澱等現(xiàn)象。一般來(lái)說是因爲環境因素影響，或者出現(xiàn)了(le)内毒素等問題;
5、發生基因突變
所需表達的基因序列發生了(le)突變，所表達出來(lái)的蛋白(bái)已經不是我們所需蛋白(bái)了(le)，自(zì)然達不到(dào)我們的要求了(le)。當然了(le)，其他(tā)位置的基因發生突變也(yě)可能(néng)會(huì)造成蛋白(bái)不表達或表達率降低(dī)的情況;
總的來(lái)說，重組蛋白(bái)表達在表達過程中，很(hěn)多因素都可能(néng)會(huì)造成其表達率降低(dī)甚至不表達，這(zhè)個時(shí)候，我們就需要通過分析，總結出其問題所在，而後在予以整改，這(zhè)樣才能(néng)保證所得蛋白(bái)達到(dào)我們的預期。當然了(le)，很(hěn)多時(shí)候，可能(néng)就是一個小(xiǎo)問題，需要有紮實的技術才可以，否則，非常的浪費時(shí)間。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供重組蛋白(bái)表達服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
