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在我們使用(yòng)大(dà)腸杆菌表達重組蛋白(bái)時(shí)，我們需要确定其的産生、定位、培養基以及産量進行确定，以便于其後期簡化工(gōng)作(zuò)的進行。所以，我們不僅需要對(duì)蛋白(bái)、培養液等物質進行小(xiǎo)規模地分析。對(duì)于那些(xiē)分析出來(lái)有利于誘導的條件進行保留，并選擇合适的方法對(duì)其進行目的蛋白(bái)純化。
如何對(duì)重組蛋白(bái)的生長和(hé)誘導?
1、按需求準備pET重組子培養液。直接從(cóng)經辦或甘油保存菌中提取一些(xiē)細胞加入到(dào)抗生素培養液中;
2、在37度環境下(xià)對(duì)培養基進行培養。提取3ml培養液，并将其加入到(dào)含有抗生素的100ml培養液中;
3、在搖床上(shàng)進行無菌培養。在适當溫度下(xià)降培養基放(fàng)在搖床上(shàng)培養2-3小(xiǎo)時(shí)，在培養過程中要不定期地提取樣品進行檢測;
4、分批次培養。在進行誘導之前，需要将培養液分成兩份，一份加入IPTG，另一份不加，通過對(duì)照，看(kàn)其具體差異。然後，保持其在适當溫度下(xià)進行培養;
總的來(lái)說，重組蛋白(bái)進行誘導表達時(shí)，不僅要測試好(hǎo)相應的培養環境，更是需要進行不同批次的檢測和(hé)對(duì)比，這(zhè)樣才能(néng)保證最佳的制備環境。當然了(le)，對(duì)于不同的蛋白(bái)，需要提供不同的環境，這(zhè)樣才能(néng)在更大(dà)程度上(shàng)保證蛋白(bái)的表達。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供重組蛋白(bái)表達服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
