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在納米抗體制備過程中，羊駝免疫可以說是制備的起點，隻有這(zhè)個過程進行得順利，後續的實驗才能(néng)夠得以進行。那麽，羊駝免疫的具體過程您知(zhī)道(dào)嗎?今天，普健生物就在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家一一介紹。
1、抗原準備。一般來(lái)說，一隻羊駝可以同時(shí)免疫1-3個抗原，劑量保持在1-2mg之間，在免疫前，我們需要将抗原與佐劑以1:1的比例進行混合，并在4度環境下(xià)保持一段時(shí)間;
2、免疫羊駝。記錄羊駝耳号，而後從(cóng)羊駝頸部靜脈2點注射，每點注射0.4mL混合液。觀察半小(xiǎo)時(shí)後，如果羊駝狀态良好(hǎo)，則每2周再免疫一次;
3、采血。4次免疫後，每隔5-7天采血一次，每次50mL;
4、血清分離。每次采血都從(cóng)其中抽取5mL血液進行預冷，而後在25度環境下(xià)進行離心，30分鐘(zhōng)後去其上(shàng)層血清用(yòng)于抗體效果評價;
5、淋巴細胞提取。在離心管中加入分離液，然後以1:1的比例加入血液(注：注入血液時(shí)要緩慢注入，防止血液與分離液混合)，之後離心30分鐘(zhōng)，而後将上(shàng)層血清保存到(dào)新的離心管中，-80度保存。取出其中棉狀免疫細胞至新的理(lǐ)線管中，加入PBS緩沖液，25度下(xià)離心20分鐘(zhōng)，去除上(shàng)清液，根據細胞數目溶解分離出淋巴細胞溶液，-80度保存;
關于免疫中需要注意的一些(xiē)事(shì)項：
1、羊駝和(hé)抗原的選擇直接關系到(dào)實驗的成敗，所以，我們盡量要選擇健康強壯狀态良好(hǎo)的羊駝，并選擇合适純度的免疫抗原;
2、淋巴液需要及時(shí)分離提取，這(zhè)樣才能(néng)在更大(dà)程度上(shàng)防止溶血情況的出現(xiàn);
3、免疫周期也(yě)可能(néng)會(huì)影響到(dào)免疫效果，一般1-2周間隔免疫最好(hǎo);
總的來(lái)說，羊駝免疫過程中需要注意到(dào)的事(shì)項很(hěn)多，但(dàn)是如果我們按照實驗規範嚴格操作(zuò)的話(huà)，就能(néng)有效提升實驗的成功率。對(duì)于大(dà)部分的客戶來(lái)說，自(zì)己免疫的成功率和(hé)成本投入量是非常高(gāo)的，這(zhè)個時(shí)候我們就可以考慮直接購買納米抗體的方式，所得的納米抗體無論是質量上(shàng)還是純度上(shàng)都能(néng)夠達到(dào)實驗要求。更多納米抗體制備知(zhī)識，盡在普健生物。
