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納米抗體作(zuò)爲一種廣泛使用(yòng)的小(xiǎo)分子抗體，因爲其體積小(xiǎo)、特異性強、穩定性好(hǎo)等一系列特點，使得其在診斷和(hé)臨床中都有着廣泛的使用(yòng)。有些(xiē)時(shí)候，我們會(huì)根據客戶的需求來(lái)設計(jì)相應的納米抗體産品，以滿足可以在抗體某些(xiē)特性方面的需求，這(zhè)類抗體我們通常稱之爲納米抗體定制服務。那麽，如何獲得高(gāo)質量定制型納米抗體呢(ne)?
我知(zhī)道(dào)，納米抗體的表面大(dà)概有10個氨基酸與人的不同，VHH中有4個突變氨基酸增加了(le)VHH的水(shuǐ)溶性，所以，我們可以通過對(duì)VH序列進行優化，以達到(dào)納米抗體人源化的目的。同時(shí)，針對(duì)特異性靶點設計(jì)，對(duì)納米抗體進行相應的設計(jì)，以達到(dào)納米抗體實現(xiàn)相關功能(néng)的目的。其中包括抗原檢測、羊駝免疫、采血、效價檢測、納米抗體噬菌體庫構建以及淘選等一系列方法，實現(xiàn)表達、檢測的一站(zhàn)式服務。其過程如下(xià)：
1、靶點免疫羊駝。通過四輪免疫之後，進行采血并從(cóng)其中提取PBMC，通過所提取的mRNA反轉錄獲得cDNA，并擴增獲得VHH可變片段;
2、羊駝納米抗體庫構建。通過獲得的VHH可變區(qū)植入到(dào)噬菌體中，通過噬菌體展示，獲得庫容爲8.76*10^9的納米抗體庫;
3.、納米抗體庫淘選及篩選。通過靶點蛋白(bái)對(duì)構建的羊駝納米抗體庫進行三輪挑選後，排除重複序列，篩選出7條不同的抗體序列，并将這(zhè)些(xiē)抗體徐磊注入到(dào)可溶性VHH抗體蛋白(bái)中，進行再次驗證;
總的來(lái)說，通過如上(shàng)一系列的操作(zuò)，不僅能(néng)獲得純度更高(gāo)的納米抗體庫，也(yě)能(néng)獲得特異性更好(hǎo)的納米抗體。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供納米抗體定制服務，如果您有相關需求，歡迎前來(lái)咨詢。普健生物還提供現(xiàn)下(xià)各種主流抗體制備産品，比如單B細胞抗體制備，歡迎咨詢。
