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我們在利用(yòng)哺乳動物表達蛋白(bái)時(shí)，因爲其能(néng)夠更好(hǎo)的促使蛋白(bái)進行正确的折疊和(hé)修飾功能(néng)實現(xiàn)，所得所得蛋白(bái)更加接近天然蛋白(bái)的狀态，所以，利用(yòng)其制備的藥品在效果方面更好(hǎo)。我們知(zhī)道(dào)，在利用(yòng)哺乳動物蛋白(bái)表達系統時(shí)，常常會(huì)通過兩種方式：瞬時(shí)轉染和(hé)穩定轉染。那麽，這(zhè)兩種方法有哪些(xiē)方面的不同呢(ne)?
瞬時(shí)轉染和(hé)穩定轉染之間有哪些(xiē)不同?
其實就操作(zuò)而言，瞬時(shí)轉染和(hé)穩定轉染大(dà)體相同，都是将目的蛋白(bái)轉染到(dào)哺乳動物體内，利用(yòng)其蛋白(bái)表達過程表達目的蛋白(bái)。但(dàn)是，瞬時(shí)轉染并沒有将目的蛋白(bái)轉染到(dào)細胞染色體上(shàng)，而是轉染至遊離的載體上(shàng)，這(zhè)樣能(néng)夠讓我們在短時(shí)間内獲得大(dà)量目的蛋白(bái)。這(zhè)個方法隻能(néng)短時(shí)間内獲得蛋白(bái)，但(dàn)是随着細胞的繁殖，會(huì)導緻外(wài)源基因的丢失，最終無法生産目的蛋白(bái);
而穩定轉染則是将目的蛋白(bái)轉染到(dào)細胞染色體上(shàng)，而後随着原細胞蛋白(bái)的表達而表達。這(zhè)個方法不會(huì)造成目的基因的丢失，能(néng)夠長期穩定地進行目的蛋白(bái)表達;
瞬時(shí)轉染和(hé)穩定轉染在操作(zuò)上(shàng)存在哪些(xiē)方面的不同?
1、瞬時(shí)轉染選擇的質粒不需要有抗性，而穩定轉染所需質粒需要有一定的抗性來(lái)進行後期的克隆株篩選;
2、瞬時(shí)轉染的操作(zuò)相對(duì)簡單，隻要在質粒構建好(hǎo)後，通過細胞複蘇、轉染、培養、蛋白(bái)純化等一系列的操作(zuò)後即可獲得目的蛋白(bái)。而穩定轉染則需要構建好(hǎo)質粒線性化，導入細胞，而後将轉染後的質粒與細胞進行融合，再通過篩選、培養等一系列的步驟後再構建相應的穩定細胞系(穩定轉染可以實現(xiàn)長期穩定地生産蛋白(bái));
總的來(lái)說，我們在進行哺乳動物蛋白(bái)表達時(shí)，完全可以根據需求來(lái)進行瞬時(shí)轉染或穩定轉染，當短期需要蛋白(bái)時(shí)，選擇瞬時(shí)轉染，長期需要蛋白(bái)時(shí)，選擇穩定轉染。當然了(le)，具體選擇也(yě)需要結合相關成本和(hé)技術支持來(lái)選擇。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供哺乳動物蛋白(bái)表達服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
