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當我們需要進行細胞内部蛋白(bái)提取需求時(shí)，我們就需要對(duì)蛋白(bái)進行破碎操作(zuò)(有關細胞提取和(hé)分離的過程可以在“蛋白(bái)純化之前常用(yòng)的一些(xiē)提取和(hé)分離方法簡介”一問查看(kàn))。那麽，細胞破碎具體有哪些(xiē)方法呢(ne)?下(xià)面普健生物就和(hé)大(dà)家一一介紹。
對(duì)于細胞破碎的方法，我們需要提前考慮破碎的目的和(hé)獨享類型。細胞的類型、大(dà)小(xiǎo)、形态、生長條件、細胞壁結構以及溫度換、PH值等都需要考慮到(dào)，綜合這(zhè)些(xiē)特性，才能(néng)找出最合适的方法。因爲在破碎的過程中會(huì)産生熱量，需要提前準備好(hǎo)冷卻樣品。而且細胞一旦破碎，就會(huì)失去代謝(xiè)調節機制的控制，目的蛋白(bái)可能(néng)會(huì)受到(dào)蛋白(bái)酶的影響。這(zhè)個時(shí)候我們就需要迅速提取出來(lái)，或者加入抑制劑，或通過低(dī)溫來(lái)降低(dī)蛋白(bái)酶的作(zuò)用(yòng)。
如下(xià)，就是普健生物爲大(dà)家總結的幾種常用(yòng)的細胞破碎方法及其優缺點。
1、超聲波法。通過強烈的超聲波迅速造成大(dà)量細胞破裂，破裂效果非常好(hǎo)，而且所需的樣品數量少，使用(yòng)最爲廣泛，但(dàn)是不适合用(yòng)來(lái)進行大(dà)規模的細胞破裂，而且對(duì)溫度控制要求較高(gāo);
2、高(gāo)速珠磨法。采用(yòng)高(gāo)速珠磨碎細胞，可以快(kuài)速有效地破裂細胞，但(dàn)是破碎的條件相對(duì)難以掌握;
3、高(gāo)壓勻漿法。通過驟然改變細胞的碰撞、壓力等方式，來(lái)實現(xiàn)細胞的被動破裂，可以用(yòng)于大(dà)規模的操作(zuò)，使用(yòng)非常的廣泛，但(dàn)是對(duì)于那些(xiē)與細胞膜結合的蛋白(bái)來(lái)說，需要進行多次破碎才能(néng)實現(xiàn);
4、凍融法。将細胞置于-15度的環境下(xià)冷凍，然後再在室溫下(xià)解凍，通過解凍的過程破碎細胞。這(zhè)個方法隻适合那些(xiē)細胞壁脆弱的類型，破碎率較低(dī)，而且容易造成蛋白(bái)失活(通常需要大(dà)量的時(shí)間);
5、酶解法。通過合适的酶來(lái)控制細胞的破裂，需要相對(duì)溫和(hé)的條件，而且專一性強，無法實現(xiàn)工(gōng)業化生産;
如上(shàng)就是普健生物爲大(dà)家總結的有關細胞破裂的幾種操作(zuò)方法，這(zhè)些(xiē)方法都能(néng)在一定程度上(shàng)對(duì)細胞進行破裂。但(dàn)是很(hěn)多方法隻适合實驗室使用(yòng)，無法實現(xiàn)大(dà)規模工(gōng)業化的生産。不過，相信在不久的未來(lái)，更多更優質的方法将會(huì)被發明(míng)出來(lái)。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)純化服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
