首頁 / 資料下(xià)載 / 知(zhī)識百科

蛋白(bái)純化之親和(hé)層析法的原理(lǐ)和(hé)優缺點

發表時(shí)間:2023-09-12 訪問次數:1057

  蛋白(bái)純化是一種常用(yòng)于提升蛋白(bái)純度的方法,它能(néng)夠提升蛋白(bái)的特性,讓實驗更加成功。蛋白(bái)純化的方法有幾種,其中較爲常用(yòng)的就是親和(hé)層析法。在這(zhè)裏,普健生物和(hé)大(dà)家具體聊聊有關親和(hé)層析蛋白(bái)的原理(lǐ)及其優缺點。

  親和(hé)層析純化的步驟:

  1、捕獲

  通過速度和(hé)容量之間進行優化組合,能(néng)夠讓産物能(néng)夠進行有效地分離、濃縮和(hé)穩定化處理(lǐ)。如果樣品帶标簽,可以選擇親和(hé)層析,如果不帶标簽,可以考慮離子交換;

  2、中度純化

  這(zhè)個過程主要用(yòng)于将目标和(hé)大(dà)體積的雜(zá)質分開(kāi)。在這(zhè)個階段,速度不再是最重要的因素,一般考慮采用(yòng)離子交換層析或疏水(shuǐ)層析進行進一步樣品提純;

  3、精細純化

  在這(zhè)個過程中,主要用(yòng)于提升高(gāo)分辨率。因爲已經去除了(le)大(dà)部分的雜(zá)質,但(dàn)是也(yě)可能(néng)造成一定的損失,這(zhè)個時(shí)候,一般考慮使用(yòng)高(gāo)分辨率的分子篩或高(gāo)分辨率的離子交換層析柱來(lái)進行純化;

  親和(hé)層析的優缺點:

  1、這(zhè)個方法非常有效,經過一步步地手段,能(néng)夠提純蛋白(bái)質,然後将蛋白(bái)分離出來(lái),而且純度非常的高(gāo);

  2、這(zhè)個方法能(néng)夠對(duì)分子進行選擇化分離,能(néng)夠提升純化倍數。經過純化後的蛋白(bái)性質更加穩定,能(néng)夠有效提升其活性回收率。而且能(néng)夠有效減少純化步驟,縮短純化時(shí)間;

  3、但(dàn)是,這(zhè)個方法載體比較昂貴,機械強度低(dī),而且所用(yòng)配給需要首先進行純化,各種成本相對(duì)較高(gāo);

  雖然說,蛋白(bái)純化的方法有好(hǎo)幾種,但(dàn)是對(duì)于不同的使用(yòng)環境來(lái)說,各個方法都有各自(zì)的優勢。而且,随着蛋白(bái)純化技術的不斷提升,相信未來(lái)能(néng)夠有更合适的方法來(lái)應對(duì)各種不同的純化需求。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)純化服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。