蛋白(bái)純化過程中鎳柱純化的原理(lǐ)及具體步驟

　　蛋白(bái)純化過程中常常會(huì)使用(yòng)到(dào)各種方法，通過特異性吸附或者滲透壓等方式提升蛋白(bái)純度，鎳柱純化就是其中最常用(yòng)的方式之一。下(xià)面，普健生物和(hé)大(dà)家具體聊聊有關鎳柱純化的相關原理(lǐ)和(hé)具體步驟。

　　蛋白(bái)鎳柱純化的原理(lǐ)：

　　通過使用(yòng)鎳柱和(hé)His标簽之間的親和(hé)力來(lái)實現(xiàn)蛋白(bái)純化的過程。當蛋白(bái)經過鎳離子濾膜時(shí)，他(tā)們會(huì)和(hé)鎳離子結合，形成鎳-蛋白(bái)複合物，這(zhè)樣，就能(néng)将蛋白(bái)從(cóng)溶液中分離出來(lái)。而後，再通過洗脫液将鎳離子和(hé)蛋白(bái)分開(kāi)，從(cóng)而獲得所需蛋白(bái);

　　鎳離子蛋白(bái)純化的具體步驟：

　　1、通過将氯化鎳倒入柱子中，平衡好(hǎo)柱子，以提供蛋白(bái)最适宜的環境;

　　2、平衡4個柱子後放(fàng)入蛋白(bái)中，可以讓蛋白(bái)自(zì)動挂上(shàng)鎳柱上(shàng)，這(zhè)樣效果也(yě)會(huì)更好(hǎo)。需要控制好(hǎo)流速，且可以循環挂柱;

　　3、挂完後，需要加入咪唑來(lái)洗脫。一般來(lái)說，咪唑會(huì)搶奪Ni的結合點，會(huì)将蛋白(bái)洗脫下(xià)來(lái);

　　4、而後可以多洗脫幾次，這(zhè)樣就能(néng)獲得純度更高(gāo)的蛋白(bái);

　　總的來(lái)說，采用(yòng)鎳柱純化蛋白(bái)能(néng)夠在一定程度上(shàng)提升蛋白(bái)的純度，但(dàn)是也(yě)隻能(néng)在一定程度上(shàng)提升純度。不過随着技術的不斷發展，相信未來(lái)蛋白(bái)的純度會(huì)越來(lái)越高(gāo)，相關成本也(yě)會(huì)越來(lái)越低(dī)。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)純化服務，如果您有相關需求，歡迎前來(lái)咨詢。