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什(shén)麽是大(dà)腸杆菌表達系統?它的優勢體現(xiàn)在哪些(xiē)方面?

發表時(shí)間:2022-11-14 訪問次數:1374

  說到(dào)大(dà)腸杆菌表達系統,相信大(dà)家都不會(huì)陌生,因爲隻要需要表達蛋白(bái)産品,第一個想到(dào)的,基本上(shàng)就是大(dà)腸杆菌蛋白(bái)表達系統。大(dà)腸杆菌是第一種用(yòng)來(lái)表達蛋白(bái)的細菌,因爲大(dà)腸杆菌存在于生物腸道(dào)中,大(dà)部分菌株是無害的,所以使用(yòng)最爲廣泛。今天,普健生物就和(hé)大(dà)家具體聊聊大(dà)腸杆菌表達系統。

  大(dà)腸杆菌表達系統的組成:表達載體、外(wài)源基因及表達宿主菌

  1、表達載體

  一般來(lái)說,一個完整的質粒表達系統需要具備複制起點、啓動子、目的基因、篩選标記以及終止子;

  2、外(wài)源基因

  原核基因可以直接在大(dà)腸杆菌中實現(xiàn)表達,真核則需要注意(因爲真核基因含有内含子,不能(néng)對(duì)nRNA進行剪切,所以,隻能(néng)用(yòng)cRNA進行表達)。一般來(lái)說,蛋白(bái)在大(dà)腸杆菌中會(huì)呈現(xiàn)不溶性的包涵體顆粒以及可溶性的蛋白(bái),我們需要根據具體情況進行具體的處理(lǐ);

  3、表達宿主菌

  大(dà)腸杆菌蛋白(bái)表達最重要的就是宿主細胞的選擇,我們需要結合宿主細胞的特性以及蛋白(bái)的特性來(lái)進行選擇。一般選擇濃度高(gāo)、成本低(dī)、不緻病不産生内毒素、發熱量低(dī)需氧量小(xiǎo)等方面的宿主;

  大(dà)腸杆菌的優勢以及不足之處:

  因爲是最早用(yòng)來(lái)表達蛋白(bái)的宿主,所以,人們對(duì)大(dà)腸杆菌的研究非常透徹,所以其表達背景清楚、表達水(shuǐ)平高(gāo)、操作(zuò)簡單、培養周期短、抗污染能(néng)力強等優勢非常的明(míng)顯。但(dàn)是,也(yě)存在着一定的不足,比如不能(néng)進行翻譯後修飾,且含有大(dà)量的内毒素。畢竟一種絕對(duì)完美(měi)的蛋白(bái)表達系統是不可能(néng)存在的,能(néng)夠滿足一定環境下(xià)的需求即可。

  大(dà)腸杆菌表達系統作(zuò)爲最開(kāi)始用(yòng)來(lái)表達蛋白(bái)的系統,其存在的一些(xiē)優勢不是其他(tā)系統可以比拟的,雖然現(xiàn)階段發展出了(le)很(hěn)多表達系統,但(dàn)是其依然占據了(le)一席之地。而且大(dà)腸杆菌表達系統也(yě)含有很(hěn)多不同的表達宿主,能(néng)夠滿足各種不同的需求,而且生産成本低(dī),是工(gōng)業蛋白(bái)制備的主要選擇。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)表達服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。