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在蛋白(bái)制備實驗過程中，蛋白(bái)純化可以說是一個非常重要的問題，隻有将蛋白(bái)純化到(dào)一定濃度後，蛋白(bái)的作(zuò)用(yòng)才會(huì)更強，實驗的才能(néng)更好(hǎo)達到(dào)我們想要的效果。但(dàn)是，在實驗中我們常常會(huì)遇到(dào)各種各樣的問題，比如蛋白(bái)沉澱，就是非常常見的問題之一。那麽，到(dào)底是什(shén)麽原因導緻蛋白(bái)沉澱的呢(ne)?今天普健生物就和(hé)大(dà)家具體分析分析。
如果完全按照實驗設計(jì)過程而來(lái)的話(huà)，一般都不會(huì)出現(xiàn)沉澱的情況，如果發生沉澱，那麽就一定是外(wài)部環境發生了(le)變化。
1、PH值變化。理(lǐ)論上(shàng)來(lái)說，蛋白(bái)有一個等電點，當PH值在蛋白(bái)等電點附近的時(shí)候，就會(huì)出現(xiàn)蛋白(bái)沉澱的現(xiàn)象;
2、濃度過高(gāo)。日常實驗中，我們配置的溶液環境不一定符合蛋白(bái)的生存環境，除了(le)溫度和(hé)PH值外(wài)，最主要的就是鹽離子濃度。如果鹽離子濃度過高(gāo)的話(huà)，就會(huì)出現(xiàn)鹽析現(xiàn)象，最終造成蛋白(bái)沉澱;
3、重金(jīn)屬脫落。在對(duì)蛋白(bái)進行Ni純化處理(lǐ)時(shí)，其中的一些(xiē)鎳離子會(huì)脫落，而這(zhè)些(xiē)脫落的重金(jīn)屬則會(huì)造成蛋白(bái)的沉積，最終造成沉澱現(xiàn)象;
4、凍融次數過多。對(duì)蛋白(bái)進行反複凍融會(huì)在一定程度上(shàng)傷害蛋白(bái)，對(duì)離子和(hé)緩沖液造成影響;
5、滋生細菌。如果将蛋白(bái)長時(shí)間放(fàng)置在4度的環境下(xià)，則容易滋生細菌，自(zì)然會(huì)造成蛋白(bái)沉澱;
總的來(lái)說，造成蛋白(bái)的原因都是一些(xiē)細節方面的操作(zuò)問題，如果我們在實驗中嚴格按照實驗步驟，并且時(shí)刻關注溶液的PH值、溫度、濃度，同時(shí)盡量做到(dào)盡快(kuài)使用(yòng)，避免反複凍融，這(zhè)樣，就能(néng)從(cóng)根本上(shàng)減少蛋白(bái)純化中沉澱情況的發生。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)純化服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
