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真核蛋白(bái)表達技術是是一種在生物藥品制備以及生物研究領域有着廣泛使用(yòng)的蛋白(bái)技術，通過将外(wài)源基因轉染之真核細胞中，使得目标蛋白(bái)得以表達。相比原核表達系統來(lái)說，真核蛋白(bái)表達系統能(néng)夠更好(hǎo)地進行折疊以及翻譯後修飾工(gōng)作(zuò)，更适合于表達那些(xiē)功能(néng)性更強的蛋白(bái)。
真核蛋白(bái)表達的原理(lǐ)：
真核蛋白(bái)表達的原理(lǐ)是通過技術手段将外(wài)源基因導入到(dào)真核細胞内，利用(yòng)宿主細胞的生物機制合成目标蛋白(bái)的過程。通過基因克隆、轉染、轉錄後翻譯、翻譯後修飾、蛋白(bái)純化、蛋白(bái)分析等一系列的手段來(lái)實現(xiàn)蛋白(bái)表達;
真核蛋白(bái)表達的流程：
1、基因克隆。将目标基因克隆到(dào)真核表達載體中，當然了(le)，根據需求進行啓動子、标記以及調控元件等元件的選擇;
2、細胞培養。将所得載體轉染到(dào)真核細胞中，而後再通過細胞培養，使得其具備蛋白(bái)表達的能(néng)力;
3、細胞篩選。從(cóng)所得細胞中篩選出能(néng)夠正常表達目标蛋白(bái)的細胞，并通過細胞裂解來(lái)獲得目的蛋白(bái);
4、蛋白(bái)純化。通過層析、透析、離心、沉澱等一系列的手段提升目的蛋白(bái)的純度;
常用(yòng)的真核蛋白(bái)表達方法：
1、哺乳動物表達系統。采用(yòng)哺乳動物細胞爲載體表達蛋白(bái)，适合大(dà)規模表達複雜(zá)蛋白(bái);
2、昆蟲杆狀病毒表達系統。采用(yòng)杆狀病毒攜帶目的基因轉染昆蟲細胞的方式來(lái)表達蛋白(bái)，适合一些(xiē)較爲簡單的真核蛋白(bái)表達，具備制備成本低(dī)、操作(zuò)簡單等方式;
3、酵母表達系統。采用(yòng)酵母細菌表達目标蛋白(bái)的方式，适合于表達一些(xiē)中等規模的蛋白(bái)，對(duì)于那些(xiē)較大(dà)規模以及高(gāo)密度表達的蛋白(bái);
綜上(shàng)所述，我們需要結合蛋白(bái)的性質和(hé)需求來(lái)選擇合适的蛋白(bái)表達系統，通過對(duì)培養條件、轉染條件等方式來(lái)提升蛋白(bái)的表達效率。當然了(le)，我們在進行蛋白(bái)表達過程中，需要選擇合适的蛋白(bái)純化方法，避免對(duì)蛋白(bái)造成影響。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供真核蛋白(bái)表達服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
