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杆狀病毒昆蟲細胞表達系統(Baculovirus Expression Vector System, BEVS)是一種以昆蟲細胞爲宿主細胞，依托杆狀病毒爲外(wài)源基因載體，從(cóng)而實現(xiàn)外(wài)源基因表達的表達系統。在生物制備領域中，昆蟲杆狀病毒表達系統是一種強大(dà)的工(gōng)具。
杆狀病毒昆蟲表達系統的制備流程：
1、質粒構建。将提取出的目的基因插入到(dào)杆狀病毒基因中(主要是線性或環狀的DNA質粒);
2、細胞轉染。将構建的質粒轉染到(dào)選定昆蟲細胞中，使得目标基因得以表達;
3、蛋白(bái)表達。對(duì)所得細胞進行培養，使得目标基因得以轉錄和(hé)翻譯，從(cóng)而實現(xiàn)目标蛋白(bái)的表達;
4、蛋白(bái)包裝。将病毒顆粒釋放(fàng)到(dào)培養基中，從(cóng)而獲得以及純化所需目的蛋白(bái);
杆狀病毒昆蟲表達系統的常用(yòng)方法：
1、轉染方法。轉染的方法很(hěn)多，比如鈣磷沉澱法、電穿孔法等;
2、标記方法。利用(yòng)對(duì)表達載體進行标記，從(cóng)而實現(xiàn)細胞的篩選;
杆狀病毒昆蟲表達系統的優勢：
1、安全性高(gāo)。因爲制備過程中僅采用(yòng)杆狀病毒來(lái)轉染昆蟲細胞，不會(huì)感染到(dào)其他(tā)細胞，所以不會(huì)對(duì)人體造成影響;
2、表達高(gāo)效。通過各種酶的使用(yòng)，使得蛋白(bái)得以正确折疊以及翻譯後修飾，從(cóng)而實現(xiàn)複雜(zá)蛋白(bái)的表達;
3、适合大(dà)規模生産。昆蟲細胞可以在無血清的培養基中生長，從(cóng)而實現(xiàn)大(dà)規模生産;
4、應用(yòng)廣泛。在蛋白(bái)功能(néng)研究、藥物發現(xiàn)研究等方面有着廣泛的使用(yòng);
杆狀病毒昆蟲表達系統的局限性：
1、表達不穩定。因爲病毒存在一定的毒性，其會(huì)造成宿主細胞的裂解，從(cóng)而影響蛋白(bái)的穩定性;
2、糖基化水(shuǐ)平低(dī)。當我們對(duì)蛋白(bái)進行糖基化時(shí)，可能(néng)會(huì)造成單的不穩定以及免疫原性;
3、基因組不穩定。杆狀病毒基因組會(huì)存在一定的不穩定性，從(cóng)而影響到(dào)蛋白(bái)的長期表達和(hé)穩定性;
杆狀病毒昆蟲表達系統的注意事(shì)項：
1、需要選擇合适的表達系統。結合目的蛋白(bái)的性質來(lái)選擇合适的表達載體，從(cóng)而确保載體與目的基因的相容性;
2、對(duì)表達條件進行優化。對(duì)于不同的昆蟲細胞，需要結合其感染以及培養條件，選擇最優的培養條件;
3、對(duì)實驗進行合理(lǐ)地設計(jì)。相對(duì)其他(tā)表達系統來(lái)說，杆狀病毒昆蟲表達系統存在一定的複雜(zá)性，需要對(duì)其實驗過程進行合理(lǐ)地設計(jì);
杆狀病毒昆蟲表達系統存在着極大(dà)的優勢，不僅高(gāo)效，而且在蛋白(bái)修飾方面有着極大(dà)的優勢，爲生物學以及制備領域研究有着極大(dà)的優勢。通過對(duì)其原理(lǐ)以及流程、操作(zuò)等方面的調整，能(néng)夠更好(hǎo)地實現(xiàn)蛋白(bái)的表達。當然了(le)，這(zhè)套蛋白(bái)表達系統也(yě)存在着一定的不足之處，需要結合具體的情況來(lái)進行選擇。更多蛋白(bái)表達的相關知(zhī)識，敬請(qǐng)關注武漢普健生物。
