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在重組蛋白(bái)表達時(shí)，我們常常通過将外(wài)源基因導入到(dào)細胞内，讓其随着細胞蛋白(bái)的表達而表達，從(cóng)而獲得目标蛋白(bái)的方式。這(zhè)個過程，我們稱之爲細胞轉染。細胞轉染的實現(xiàn)過程有很(hěn)多，比如化學轉染法、物理(lǐ)轉染法、生物轉染法等等。可以說，細胞轉染是實現(xiàn)基因編輯、蛋白(bái)表達、信号傳導等一系列研究的重要方法。
細胞轉染現(xiàn)階段主要有兩種：穩定轉染和(hé)瞬時(shí)轉染(關于穩定轉染和(hé)瞬時(shí)轉染的相關知(zhī)識以及穩定細胞株構建的步驟，大(dà)家可以點擊“哺乳動物蛋白(bái)表達瞬時(shí)轉染與穩定轉染之間有哪些(xiē)不同?”查看(kàn))。
細胞轉染的常見問題有哪些(xiē)?
1、哪些(xiē)因素會(huì)影響到(dào)細胞的轉染率
質粒。質粒的選擇從(cóng)直接上(shàng)關系到(dào)轉染的效率，其濃度也(yě)會(huì)在極大(dà)程度上(shàng)影響着轉染的效率(一般不要低(dī)于1000ng/uL);
細胞。首先要保證所選是一個活性較高(gāo)的細胞，對(duì)于不同的細胞來(lái)說，轉染方法和(hé)試劑的選擇不同，轉染的效率也(yě)會(huì)存在極大(dà)的差異;
方法。按照說明(míng)書來(lái)選擇合适的轉染方法，并确定好(hǎo)最佳的轉染條件;
2、細胞轉染無法提高(gāo)轉染率要怎麽解決
當出現(xiàn)細胞轉染效率低(dī)的情況時(shí)，可以選通過構建穩定細胞株的方式，或者通過藥物的加壓篩選來(lái)進行，這(zhè)樣一般都能(néng)解決轉染效率低(dī)的情況;
3、怎麽選擇合适的細胞轉染
目前常用(yòng)的轉染方法主要有物理(lǐ)轉染法以及化學試劑等轉染方法，但(dàn)是也(yě)各具優缺點。比如物理(lǐ)轉染法需要使用(yòng)到(dào)一些(xiē)昂貴的儀器，一般的實驗室無法滿足這(zhè)些(xiē)要求;而化學轉染法使用(yòng)相對(duì)更加廣泛，價格便宜、操作(zuò)簡單，但(dàn)是隻能(néng)用(yòng)于一些(xiē)較爲常規的細胞，對(duì)于一些(xiē)個性化的細胞轉染效率則會(huì)相對(duì)低(dī)下(xià);
細胞轉染作(zuò)爲外(wài)源基因的引入方式，可以說在直接上(shàng)關系着蛋白(bái)表達的效率或成功率，可以說是蛋白(bái)表達成功的第一步。所以，如何選擇載體并構建好(hǎo)合适的轉染環境，在極大(dà)程度上(shàng)制約着蛋白(bái)的表達。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)表達服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
