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蛋白(bái)是生物體内的重要成分，它參與生物學功能(néng)中的各種角色，無論是結構支撐還是代謝(xiè)調節，都有着它的身影。爲了(le)研究蛋白(bái)的特性，科學家們往往需要将所需蛋白(bái)從(cóng)細胞内提取出來(lái)，其中涉及到(dào)的操作(zuò)可謂多種多樣。在這(zhè)個過程中，也(yě)衍生出了(le)各種專業名詞。就比如蛋白(bái)提取和(hé)蛋白(bái)純化，從(cóng)字面意思上(shàng)來(lái)說都是講蛋白(bái)分離出來(lái)，但(dàn)是，爲什(shén)麽又要用(yòng)到(dào)兩個詞呢(ne)?今天，普健生物和(hé)大(dà)家具體聊聊。
蛋白(bái)提取和(hé)蛋白(bái)純化是同一個操作(zuò)嗎?
不是的。蛋白(bái)提取的主要過程是将蛋白(bái)從(cóng)細胞中分離出來(lái)，最後的操作(zuò)可以看(kàn)做是初步的純化操作(zuò)，而蛋白(bái)純化則是提升混合液中蛋白(bái)濃度的一種方法。想要進一步了(le)解，我們隻需要了(le)解到(dào)蛋白(bái)的具體提取過程就行。
蛋白(bái)提取的過程是怎樣的?
1、細胞破碎。通過機械法(超聲波、攪拌等)、化學法(細胞壁酶等)方法将細胞進行破碎，使得細胞内的蛋白(bái)得以釋放(fàng);
2、離心。将破碎後的混合物進行離心，去除底部的細胞壁和(hé)細胞核，從(cóng)而獲得包含蛋白(bái)的上(shàng)清液;
3、沉澱。通過添加鹽或是有機溶劑，使得其中的雜(zá)質得以沉澱，而後在通過離心或過濾的方式來(lái)進行收集;
4、萃取。通過固相吸附劑等物質對(duì)所得蛋白(bái)進行富集和(hé)分離;
蛋白(bái)純化的過程是怎樣的?
蛋白(bái)純化是将蛋白(bái)從(cóng)蛋白(bái)提取後的溶液中分離出來(lái)的一種方法，通過這(zhè)個操作(zuò)，能(néng)夠極大(dà)程度上(shàng)提升蛋白(bái)的濃度。具體純化方法，我們一般選擇如下(xià)幾種：
1、凝膠電泳。這(zhè)個方法是按照蛋白(bái)的大(dà)小(xiǎo)、電荷等性質分離蛋白(bái)，通過凝膠電泳，将相關特性的蛋白(bái)分離出來(lái)，主要用(yòng)作(zuò)蛋白(bái)的分析以及預處理(lǐ);
2、柱層析。主要原理(lǐ)是根據蛋白(bái)分子的大(dà)小(xiǎo)、電荷、親和(hé)力等特性，将蛋白(bái)從(cóng)雜(zá)質中分離出來(lái)的方法;
3、親和(hé)純化。通過目标蛋白(bái)的特異性分析，将其與具備相關特性的配體進行親和(hé)性結合，将目标蛋白(bái)吸附到(dào)某種固相材料上(shàng)，而後再将其洗脫下(xià)來(lái)，以獲得目标蛋白(bái);
4、超濾法。采用(yòng)一些(xiē)超濾技術，将小(xiǎo)分子雜(zá)質從(cóng)中過濾出去，從(cóng)而獲得純度更高(gāo)的蛋白(bái);
其實大(dà)家不難看(kàn)出，蛋白(bái)提取與蛋白(bái)純化其實就是蛋白(bái)制備中的兩個步驟，進行蛋白(bái)提取之後，根據需求再進行蛋白(bái)純化工(gōng)作(zuò)，以便于更好(hǎo)的對(duì)蛋白(bái)進行應用(yòng)。蛋白(bái)制備其實是一個非常嚴謹且複雜(zá)的過程，需要注意好(hǎo)相關細節操作(zuò)，才能(néng)更好(hǎo)的保證蛋白(bái)的表達。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)表達服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
