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蛋白(bái)制備完成後，我們需要對(duì)其進行純化以便于提升其各方面的性質。那麽，如何進行蛋白(bái)純化呢(ne)?一般來(lái)說，通過分子的大(dà)小(xiǎo)、蛋白(bái)性質以及外(wài)部環境等方面的不同，對(duì)蛋白(bái)進行純化。下(xià)面，普健生物具體和(hé)大(dà)家聊聊有關抗體純化的常用(yòng)原理(lǐ)。
1、分子大(dà)小(xiǎo)
對(duì)于不同的蛋白(bái)來(lái)說，其分子大(dà)小(xiǎo)也(yě)是各不相同的。所以，我們可以結合不同分子的大(dà)小(xiǎo)，通過透析、超濾、離心分離等一系列的手段進行蛋白(bái)純化操作(zuò);
2、分子形狀
蛋白(bái)分子在離心通過溶液時(shí)，在通過膜、凝膠等填充材料時(shí)，都會(huì)受到(dào)分子影響。所以，對(duì)于不同形狀的蛋白(bái)分子來(lái)說，可以利用(yòng)這(zhè)個方式來(lái)進行純化;
3、蛋白(bái)溶解度
影響到(dào)蛋白(bái)溶解度的外(wài)界因素有很(hěn)多，比如PH值、離子強度、溫度等，都會(huì)在一定程度上(shàng)影響到(dào)蛋白(bái)的溶解度。所以，通過調節PH值、溫度等一系列的外(wài)界環境，提升蛋白(bái)濃度;
4、疏水(shuǐ)性
對(duì)于不同的蛋白(bái)來(lái)說，其親疏水(shuǐ)性是各不相同的，而後通過調整鹽水(shuǐ)溶液濃度來(lái)析出蛋白(bái);
5、蛋白(bái)穩定性
通過對(duì)熱穩定性以及酶解穩定性等方面的調整，從(cóng)而對(duì)蛋白(bái)進行純化;
蛋白(bái)純化過程中的常見問題有哪些(xiē)?
1、層析柱的壽命有多久?填料的使用(yòng)次數不同和(hé)條件有異，操作(zuò)過程一定要規範，就能(néng)夠保證層析柱狀态最佳;
2、柱子堵了(le)、超壓如何處理(lǐ)?将柱子寫下(xià)來(lái)，結合說明(míng)書進行相關操作(zuò);
3、如何去除核酸雜(zá)質?核酸帶浮點，可以通過陽離子柱上(shàng)流，從(cóng)而有效去除核酸;
4、柱子進氣泡了(le)怎麽辦?一般來(lái)說是因爲溫度變化，我們可以用(yòng)離子水(shuǐ)或乙醇反響高(gāo)速沖洗;
5、柱子有色素如何去除?結合填料的耐受情況，優先選擇NaOH進行清洗，也(yě)可以使用(yòng)有機溶劑清洗，在嘗試酸，如果依然去除不掉，也(yě)可以選擇定期更換填料;
總的來(lái)說，蛋白(bái)純化的操作(zuò)相對(duì)來(lái)說也(yě)沒那麽困難，結合蛋白(bái)特性，在結合相關文(wén)獻，選擇最合适的蛋白(bái)純化方法。在純化的過程中，做好(hǎo)相應的細節過程，這(zhè)樣才能(néng)獲得更加優質的蛋白(bái)産品。普健生物專業爲您提供蛋白(bái)純化服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
