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在“重組蛋白(bái)之蛋白(bái)純化的原理(lǐ)與步驟”一文(wén)中，我們和(hé)大(dà)家詳細介紹了(le)蛋白(bái)純化的相關原理(lǐ)和(hé)具體步驟，相信大(dà)家對(duì)蛋白(bái)純化也(yě)有了(le)初步的了(le)解。那麽，有關重組蛋白(bái)純化的方法您了(le)解多少呢(ne)?今天，普健生物就在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家具體聊聊。
我們知(zhī)道(dào)，不同的蛋白(bái)在物理(lǐ)、化學、生物活性等方面都有着極大(dà)的不同，因爲其氨基酸序列和(hé)數量的不同，連接氨基酸殘基可能(néng)是荷正電也(yě)可能(néng)是荷負電的、極性或是非極性的、親水(shuǐ)或是疏水(shuǐ)的。所以，我們完全可以根據它們的這(zhè)些(xiē)特點來(lái)對(duì)其進行相關純化工(gōng)作(zuò)。
方法一：超速離心法
超速離心法主要用(yòng)于分離亞細胞和(hé)蛋白(bái)，利用(yòng)個例子在梯度液中沉降速度不同的原理(lǐ)，使得不同沉降速度的顆粒處于不同密度的梯度層中，從(cóng)而達到(dào)分離的目的;
方法二：選擇性沉澱法
選擇性沉澱法其實就是利用(yòng)各種沉澱劑或者通過改變某些(xiē)條件來(lái)促使分層沉澱，進而實現(xiàn)蛋白(bái)的純化。
常用(yòng)的方法有鹽析沉澱法、有機溶劑沉澱法、水(shuǐ)溶性非離子型聚合物沉澱法等方法來(lái)實現(xiàn)蛋白(bái)純化操作(zuò)，具體方式及其優劣我們将在後文(wén)中和(hé)大(dà)家詳細介紹;
方法三：凝膠層析法
凝膠層析法也(yě)被稱爲分子篩過濾法，其實就是利用(yòng)分子大(dà)小(xiǎo)的不同，将蛋白(bái)分離出來(lái)。相比其他(tā)方法來(lái)說，凝膠沉澱法操作(zuò)相對(duì)溫和(hé)，對(duì)蛋白(bái)造成的影響相對(duì)要小(xiǎo)一些(xiē);
方法四：離子交換層析法
離子交換層析法是利用(yòng)分子所含電荷的吸附作(zuò)用(yòng)不同來(lái)實現(xiàn)。我們和(hé)大(dà)家提到(dào)過，蛋白(bái)的等電點不同，其所帶電荷量也(yě)是各不相同的，所以，通過在纖維素上(shàng)加入電荷位置，從(cóng)而實現(xiàn)吸附蛋白(bái)的效果;
方法五：親和(hé)層析法
親和(hé)層析法其實就是利用(yòng)生物大(dà)分子的特異性，類似親和(hé)力結合的方式來(lái)實現(xiàn)蛋白(bái)的吸附;
總的來(lái)說，上(shàng)面五種方法所針對(duì)的方面不同，其實也(yě)是針對(duì)各類蛋白(bái)在大(dà)小(xiǎo)、特性等方面的不同來(lái)實現(xiàn)蛋白(bái)的純化操作(zuò)。對(duì)于不同的純化需求來(lái)說，五種方法可謂各具優勢，需要有選擇地進行選擇。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供重組蛋白(bái)純化服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
