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在進行重組蛋白(bái)表達時(shí)，需要通過一定的技術手段将目的基因置入到(dào)宿主細胞内，這(zhè)個過程我們稱之爲細胞轉染。前文(wén)中我們和(hé)大(dà)家介紹過細胞轉染的一些(xiē)方法，比如物理(lǐ)介導法、生物介導法等(詳情可查看(kàn)“什(shén)麽是細胞轉染技術?盤點細胞轉染的原理(lǐ)及其的特點”)。可以說，細胞轉染成功與否直接關系到(dào)重組蛋白(bái)表達的成功。那麽，細胞轉染時(shí)有哪些(xiē)因素會(huì)影響到(dào)因素呢(ne)?
1、血清
血清會(huì)在一定程度上(shàng)影響到(dào)蛋白(bái)的表達，比如DNA陽離子脂質體複合物形成時(shí)是不能(néng)包含血清的，而且血清也(yě)曾一度被認爲會(huì)降低(dī)轉染效率，同時(shí)，對(duì)于那些(xiē)對(duì)血清含量比較敏感的細胞，會(huì)在極大(dà)程度上(shàng)影響到(dào)蛋白(bái)的表達;
2、抗生素
抗生素(青黴素、鏈黴素等)會(huì)在一定程度上(shàng)影響到(dào)細胞轉染，有一些(xiē)細胞會(huì)受到(dào)抗生素的影響，需要結合具體情況來(lái)選擇是否添加抗生素;
3、細胞狀态
細胞轉染的過程非常重要，一定不要急于求成，需要讓細胞保持在最佳狀态時(shí)再進行轉染。一般來(lái)說，除了(le)細胞狀态外(wài)，還需要盡量保證不要用(yòng)傳代太多次的細胞去做;
4、細胞鋪闆密度
不同的細胞其最佳培養密度是各不相同的，需要結合細胞的類型以及應用(yòng)而異;
5、啓動子選擇
想要獲得高(gāo)轉染的活性細胞，和(hé)其所選擇的啓動子相關性是非常高(gāo)的。比如，CMV啓動子在大(dà)多數細胞類型中可以獲得較高(gāo)表達活性;
6、DNA量
高(gāo)質量的DNA量對(duì)于高(gāo)效表達可以說是至關重要的，轉染的質粒無論是在純度還是在濃度方面都有着很(hěn)高(gāo)的需求;
總的來(lái)說，影響到(dào)細胞轉染效率的因素是非常多的，都需要結合實際情況來(lái)進行選擇。所以，我們除了(le)按照實驗順序進行轉染，同時(shí)調整好(hǎo)相應的轉染環境外(wài)，還需要主要好(hǎo)相應的細節問題。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)表達服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
