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目前的生物行業發展可謂是紅(hóng)紅(hóng)火火，幾乎成爲全球矚目的熱點，甚至喬布斯都預言：下(xià)一個經濟發展的爆點必然是生命大(dà)健康行業。而随着人們生活水(shuǐ)平的不斷提高(gāo)，人們對(duì)健康的渴望也(yě)變得越發迫切起來(lái)。但(dàn)是，我們每天都在說蛋白(bái)純化，但(dàn)是，奇怪的是我們好(hǎo)像日常用(yòng)不上(shàng)它，它到(dào)底是用(yòng)來(lái)幹嘛的呢(ne)?今天普健生物就和(hé)大(dà)家具體聊聊。
其實蛋白(bái)純化技術在生物化學領域有着重要的作(zuò)用(yòng)，也(yě)是使用(yòng)最爲廣泛且重要的技術之一。打個比方，一個真核細胞可以産生數以千計(jì)的蛋白(bái)，這(zhè)些(xiē)蛋白(bái)的作(zuò)用(yòng)可謂千奇百怪，而且含量也(yě)是各不相同，有的蛋白(bái)含量很(hěn)高(gāo)，有的甚至隻有幾個，而且這(zhè)些(xiē)蛋白(bái)之間會(huì)相互影響，所以，如果我們想要研究某個蛋白(bái)的特性，就需要将其中的蛋白(bái)和(hé)非蛋白(bái)分離出來(lái)，這(zhè)個過程也(yě)就是我們常說的蛋白(bái)純化。
蛋白(bái)純化的方法介紹：
一、根據溶解質不同的分離方法
1、鹽析法。簡單來(lái)說，不同蛋白(bái)會(huì)随着鹽濃度的不同而溶解度變化的情況，也(yě)就是我們常說的岩溶。當鹽濃度持續升高(gāo)時(shí)，蛋白(bái)的溶解度會(huì)出現(xiàn)不同程度的下(xià)降并析出，這(zhè)個現(xiàn)象就稱之爲鹽析;
2、等電點沉澱法。不同蛋白(bái)在經典狀态下(xià)的斥力最小(xiǎo)，溶解度也(yě)最小(xiǎo)，也(yě)就是說，而不同蛋白(bái)的等電點是不同的。所以，我們可以通過調節溶劑的PH值，使得其達到(dào)某一蛋白(bái)的等電點，而造成沉澱的現(xiàn)象。隻是，如果單獨的使用(yòng)這(zhè)個方法效率較高(gāo)，我們通常會(huì)結合鹽析法來(lái)使用(yòng)以提交其效率;
3、低(dī)溫有機溶劑沉澱法。在溶液中添加甲醇、乙醇或丙酮等有機溶劑，當達到(dào)一定的濃度後，可以造成一些(xiē)蛋白(bái)溶解析出(PS：這(zhè)個方法雖然在效果上(shàng)要優于鹽析法，但(dàn)是容易造成蛋白(bái)變質，需在低(dī)溫環境下(xià)使用(yòng));
二、根據分子大(dà)小(xiǎo)的分離方法
1、透析、超濾。其實就是采用(yòng)半透膜将大(dà)小(xiǎo)不同的蛋白(bái)質分開(kāi)的方法。當然了(le)，如果覺得透析的速度太慢，可以考慮采用(yòng)超濾的方式，也(yě)就是采用(yòng)高(gāo)壓或離心機的原理(lǐ)，使得水(shuǐ)和(hé)小(xiǎo)分子強行通過半透膜，留下(xià)我們需要的蛋白(bái)産品的方式;
2、凝膠過濾法。有可以稱之爲分子篩層析法。它是根據分子大(dà)小(xiǎo)進行分離的方式，采用(yòng)填料葡萄糖凝膠和(hé)瓊脂糖凝膠的方式;
三、根據蛋白(bái)帶電性質不同進行分離
1、電泳法。不同蛋白(bái)在同一PH環境下(xià)的電量不同，使得其在遷移時(shí)分部會(huì)變得不同。所以，我們可以采用(yòng)這(zhè)個方式對(duì)其進行分離;
2、例子交換層析法。用(yòng)例子交換層析柱對(duì)蛋白(bái)溶液進行分離時(shí)，會(huì)将帶有與離子交換劑相反的蛋白(bái)吸附出來(lái)，然後再采用(yòng)改變PH值或是離子強度的方法将蛋白(bái)洗脫下(xià)來(lái);
四、根據蛋白(bái)特異性的分離方法
也(yě)就是親和(hé)色譜法，其實就是一套多種方法的聯合使用(yòng)方式。通過對(duì)組織搗碎、超聲波處理(lǐ)、反複凍融，最後通過化學處理(lǐ)方法的方式，後面我們會(huì)和(hé)大(dà)家具體聊聊有關這(zhè)個方法的詳細過程，在這(zhè)裏我們就不一一贅述了(le);
總的來(lái)說，無論采用(yòng)那種方法，都需要結合蛋白(bái)的特性來(lái)挑選合适的方法，這(zhè)樣不僅能(néng)提純出我們需要的蛋白(bái)産品，更是能(néng)夠在極大(dà)程度上(shàng)節約我們的處理(lǐ)時(shí)間和(hé)物料投入。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)純化服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
