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蛋白(bái)純化失敗?那你(nǐ)需要考慮考慮如下(xià)因素

發表時(shí)間:2022-12-14 訪問次數:1473

  在之前的一次實驗中,不知(zhī)道(dào)因爲什(shén)麽原因,導緻實驗結果完全達不到(dào)預期。後來(lái)通過檢測才發現(xiàn)是因爲蛋白(bái)純化不夠,雜(zá)質太多以及蛋白(bái)濃度不夠,最終導緻實驗失敗。爲什(shén)麽做過蛋白(bái)純化,純度還達不到(dào)實驗要求呢(ne)?今天普健生物就和(hé)大(dà)家具體聊聊。

  1、在蛋白(bái)純化之前,我們需要對(duì)其進行相應的測試,當然了(le),在進行測試之前,需要對(duì)蛋白(bái)的相關屬性進行了(le)解。比如蛋白(bái)的性質、敏感性、溶解度、PH敏感已經環境需求等;

  2、蛋白(bái)的用(yòng)途了(le)解。一般來(lái)說,如果大(dà)量級的蛋白(bái)制備需求,則需要考慮到(dào)層析柱的尺寸問題,以及所得蛋白(bái)濃度問題,是否需要保持活性等等,隻有這(zhè)些(xiē)方面都了(le)解了(le),才能(néng)更好(hǎo)地制備蛋白(bái);

  3、蛋白(bái)的檢測。不同的方法檢測出的蛋白(bái)性質是有一定差别的。比如不同組分的蛋白(bái)溶液,需要結合其靈敏度、精密性、準确度等方面來(lái)綜合考慮純化的步驟,所以,選擇的檢測方法也(yě)需要有所針對(duì)性才行;

  4、緩沖物。爲了(le)提高(gāo)蛋白(bái)的穩定性、減少微生物生長、降低(dī)冰點或保持蛋白(bái)活性等需求,我們需要添加各種添加劑,比如蛋白(bái)酶抑制劑、防腐劑、還原劑等等。這(zhè)個就需要結合蛋白(bái)的需求來(lái)考慮添加那種緩沖物;

  5、存儲條件。在保持活性的前提下(xià),選擇合适的溫度、合适的PH值、是否冰凍、容器儲存等操作(zuò);

  總的來(lái)說,蛋白(bái)純化前,我們需要對(duì)蛋白(bái)的相關性質進行了(le)解,有針對(duì)性地選擇純化方式,過程中需要對(duì)其進行相關性質檢測,以保證其能(néng)達到(dào)我們的需求;純化完成後,需要結合特性對(duì)其進行保存,以保證其活性的同時(shí)增長其保存時(shí)間。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)純化服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。