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大(dà)腸杆菌表達系統作(zuò)爲五大(dà)蛋白(bái)表達系統之一，因爲其使用(yòng)最早、遺傳背景清晰等特點，使得其即便在表達系統越來(lái)越多的今天，依然是主要的工(gōng)具。因爲大(dà)腸杆菌增殖時(shí)間較短，表達起來(lái)非常的快(kuài)捷，一般的重組蛋白(bái)在大(dà)腸杆菌中一周之内就能(néng)表達成功。那麽，大(dà)腸杆菌表達系統還有什(shén)麽其他(tā)特點呢(ne)?今天普健生物就和(hé)大(dà)家具體聊聊。
1、可形成包涵體
一般來(lái)說，非真核生物表達的蛋白(bái)都不會(huì)形成包涵體，但(dàn)是，大(dà)腸杆菌這(zhè)類的過表達原核生物會(huì)形成包涵體，而且在大(dà)腸杆菌中，蛋白(bái)修飾後翻譯、折疊的效率要比真核細胞高(gāo)10倍以上(shàng)，從(cóng)而促進包涵體的形成。
包涵體會(huì)在極大(dà)程度上(shàng)影響可溶性活性蛋白(bái)的産生，但(dàn)也(yě)因爲如此，使得其不易被蛋白(bái)酶降解，從(cóng)而減少被其他(tā)蛋白(bái)污染的發生。當然了(le)，通過一定的手段，也(yě)可以将包涵體再折疊成可溶性蛋白(bái);
2、通過溫度來(lái)減少包涵體的形成
将溫度保持在15-30度之間，能(néng)夠形成更多可溶性蛋白(bái)的同時(shí)，盡可能(néng)少地形成包涵體。據研究顯示，這(zhè)個區(qū)間的溫度可能(néng)會(huì)在一定程度上(shàng)降低(dī)蛋白(bái)的轉率、折疊的效率，從(cóng)而促進蛋白(bái)的正确折疊。而且這(zhè)個溫度下(xià)，能(néng)夠有效降低(dī)蛋白(bái)酶的活性，更大(dà)可能(néng)性地保持蛋白(bái)活性;
3、可添加融合标簽提高(gāo)重組蛋白(bái)可溶性
和(hé)其他(tā)重組蛋白(bái)表達方式一樣，在大(dà)腸杆菌表達系統中，我們可以适當地加入一些(xiē)融合标簽來(lái)促進蛋白(bái)的可溶性。同時(shí)，可以通過精确地對(duì)融合标簽進行切除、融合等手段，有效控制蛋白(bái)的制備;
4、形成二硫鍵
一般來(lái)說，大(dà)腸杆菌因爲有二硫鍵氧化還原酶的催化作(zuò)用(yòng)，使得其爲大(dà)腸杆菌表達系統二硫鍵唯一形成的場所。所以，我們可以通過多大(dà)腸杆菌的基因組進行修改，從(cóng)而在細胞質内形成一個更好(hǎo)的二硫鍵形成環境;
5、可翻譯後修飾
相對(duì)其他(tā)表達系統來(lái)說，大(dà)腸杆菌對(duì)蛋白(bái)翻譯後修飾的能(néng)力有限，需要有針對(duì)性地進行優化;
所以，對(duì)于一個表達系統而言，其表達的蛋白(bái)是否高(gāo)質量，更多程度上(shàng)取決于蛋白(bái)本身特性，隻有針對(duì)相對(duì)合适的表達系統，才能(néng)實現(xiàn)高(gāo)表達、高(gāo)質量的蛋白(bái)産品，因爲對(duì)于一個表達系統來(lái)說，其一定存在優勢和(hé)不足之處。所以，如果想要實現(xiàn)蛋白(bái)的高(gāo)質量表達，合适的表達系統選擇是首要的。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供大(dà)腸杆菌蛋白(bái)表達服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
