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作(zuò)爲生命的主要承擔者，蛋白(bái)一直是科研項目中備受關注的一員。在生命體中，蛋白(bái)一直都不是單一運作(zuò)的，往往需要很(hěn)多蛋白(bái)共同配合來(lái)完場一個動作(zuò)。這(zhè)個時(shí)候，人們就提出了(le)一個新的理(lǐ)念：蛋白(bái)互作(zuò)。現(xiàn)階段的蛋白(bái)互作(zuò)技術您了(le)解多少?下(xià)面，普健生物和(hé)大(dà)家具體聊聊。
什(shén)麽是蛋白(bái)互作(zuò)?
蛋白(bái)互作(zuò)(PPls)其實就是一相細胞的基礎事(shì)件，他(tā)發生在細胞結構和(hé)細胞器的每一個生理(lǐ)過程中，蛋白(bái)之間的配合、作(zuò)用(yòng)，最終完成細胞所需的一次生理(lǐ)周期過程。
蛋白(bái)互作(zuò)分析的意義?
蛋白(bái)互作(zuò)分析能(néng)夠闡明(míng)蛋白(bái)質的相互作(zuò)用(yòng)在何時(shí)、何地發生以及蛋白(bái)質複合物如何形成爲确定蛋白(bái)質生物學功能(néng)提供了(le)重要基礎。可以說，通過這(zhè)項技術，我們能(néng)夠更好(hǎo)地對(duì)細胞進行研究，以便于進一步了(le)解生命。
那麽，蛋白(bái)互作(zuò)分析的方法有哪些(xiē)呢(ne)?
就目前而言，常用(yòng)的蛋白(bái)互作(zuò)分析方法主要有四種，具體如下(xià)：
1、親和(hé)純化及免疫共沉澱
免疫共沉澱技術簡稱COIP技術，是通過抗原抗體之間的特異性結合原理(lǐ)完成，通過在細胞裂解液中添加特異性抗體，使得抗原和(hé)抗體形成沉澱，而後在通過複合物觀察并驗證抗原與其他(tā)蛋白(bái)之間相互作(zuò)用(yòng)的方法;
這(zhè)個方法能(néng)真實檢測體内的生理(lǐ)情況，實驗條件溫和(hé)，并且可以分離到(dào)天然狀态的蛋白(bái)化合物。但(dàn)是對(duì)于那些(xiē)結合力弱的蛋白(bái)來(lái)說，效果就顯得差強人意了(le);
2、Pull Down
Pull-Down技術，其實就是利用(yòng)相對(duì)固化并且标記過後的标簽蛋白(bái)從(cóng)細胞裂解液中釣出與之相對(duì)應的蛋白(bái)的方法。而後通過對(duì)那些(xiē)被“釣”出來(lái)蛋白(bái)進行研究，從(cóng)而确定蛋白(bái)之間相互作(zuò)用(yòng)的關系。
3、雙分子熒光互補
雙分子熒光互補技術指的是通過将熒光蛋白(bái)的多肽鏈在不保守的氨基酸處切開(kāi)，形成兩個多肽片段，而後将這(zhè)兩個多肽片段分别鏈接到(dào)一對(duì)能(néng)發生互補作(zuò)用(yòng)的目标蛋白(bái)上(shàng)。當這(zhè)兩個蛋白(bái)相互作(zuò)用(yòng)時(shí)，會(huì)造成兩個分開(kāi)的熒光蛋白(bái)互補，從(cóng)而發出熒光;
4、酵母雙雜(zá)交實驗
酵母雙雜(zá)系統是當前使用(yòng)最爲廣泛的一種方法，它通過将靶蛋白(bái)和(hé)誘導蛋白(bái)特異性結合，誘餌蛋白(bái)結合于報(bào)道(dào)基因的啓動子,啓動報(bào)道(dào)基因在酵母細胞内的表達,如果檢測到(dào)報(bào)道(dào)基因的表達産物,則說明(míng)兩者之間有相互作(zuò)用(yòng),反之則兩者之間沒有相互作(zuò)用(yòng);
這(zhè)四種方法各具特色，适合于不同的使用(yòng)環境，我們在進行相關實驗的時(shí)候，可以結合當前的情況選擇最适合的方法。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)抗體表達服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
